聯(lián)系電話:
18502669006
天津本生生物在這提醒大家做細胞培養(yǎng)時,要注意血清的分裝:以下就是相關(guān)問題詳解,不妨來看看
血清是細胞培養(yǎng)中重要的元素之一
1. 血清保存 : 建議血清應(yīng)保存在-5至-2O
2. 解凍血清的方法 : 建議您將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8冰箱使之融解
3. 血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)
,該如何處理?血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因
,但原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量。若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi)
,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞您的過濾膜。4. 為什么要熱滅活血清?
加熱可以滅活補體系統(tǒng)
。激活的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學(xué)研究,培養(yǎng)ES細胞,昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活血清。5. 有必要做熱滅活嗎?
實驗顯示
,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,對大多數(shù)的細胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或*沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量,而造成細胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37環(huán)境中因此我們建議您
6. 為什么儲存在冰箱中的胎牛血清會出現(xiàn)沉淀?
胎牛血清沒有預(yù)老化,儲存在2-8時
,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。這應(yīng)該不會影響血清的質(zhì)量。推薦在-20儲存胎牛血清,避免反復(fù)凍融。7. 如何避免沉淀物的產(chǎn)生?
解凍血清時
,請按照所建議的逐步解凍法(-20至4至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20至37),實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻
,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。請勿將血清置于37太久
。若在37放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要
,可以無須做此步驟。若必須做血清的熱滅活,請遵守56
,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高
注:以上資料僅供參考!
技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng) 管理登陸 網(wǎng)站地圖