聯(lián)系電話:
18502669006
您現(xiàn)在的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 關(guān)于實(shí)驗(yàn)室移液器吸頭相關(guān)知識點(diǎn)您可知
標(biāo)簽:移液器吸頭 濾芯吸頭 移液器 技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng) 管理登陸 網(wǎng)站地圖
關(guān)于實(shí)驗(yàn)室移液器吸頭工作原理
移液器槍頭盒的作用是什么?盒子是用來保護(hù)吸頭
1. 使用合適的吸頭:
為確保更好的準(zhǔn)確性和精度
2. 吸頭的安裝:
對于大多數(shù)品牌的移液器,特別是多道移液器
3. 吸頭浸入角度和深度:
吸頭浸入角度控制在傾斜20度之內(nèi),保持豎直為佳;吸頭浸入深度建議如下所示:
移液器規(guī)格吸頭浸入深度
2L和10 L 1 mm
20L和100 L 2-3 mm
200L和1000 L 3-6 mm
5000 L和10 mL 6-10 mm
4. 吸頭潤洗:
對常溫樣品
5. 吸液速度:
移液操作應(yīng)保持平順
【專家建議】:
1
2
3、每年對移液器進(jìn)行1-2次校正(視使用頻率而定)。
4、絕大多數(shù)移液器,在使用前和使用一段時間后,要給活塞涂上一層潤滑油以保持密封性;對于RAININ常規(guī)量程的移液器,不涂潤滑油也同樣擁有理想的密封性。
>>自動微量移液器再配以帶濾芯的吸頭是PCR實(shí)驗(yàn)的*工具:
自動DNA合成儀合成的寡核苷酸引物無需進(jìn)一步純化即可用于標(biāo)準(zhǔn)PCR。如果引物經(jīng)過市售樹脂柱色譜(如NENSORB; NEN Life Science公司產(chǎn)品)或變性聚bxxa凝膠純化,從哺乳動物基因組模板擴(kuò)增單拷貝序列的效率會更高(在第2章,方案3中)。
●模板DNA。模板可以是DNA的片段、制備的基因組DNA、 重組質(zhì)粒,或者是任何其他含有DNA的樣本。模板DNA溶解于含有低濃度EDTA (<0.1mmol/L) 的10mmol/L Tris-Cl(pH7.6)。
●耐熱的DNA聚合酶。Taq DNA聚合酶是適用于大多數(shù)形式的PCR擴(kuò)增階段的標(biāo)準(zhǔn)的、合適的酶。但是,當(dāng)3'端錯配引物延伸可疑時,可優(yōu)先考慮具有3'→5'校正活性的熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Chianget al.1993) (參見前頁“熱穩(wěn)定DNA聚合酶”部分和信息欄“Taq DNA聚合酶”)。
Taq DNA聚合酶儲存于含有50%甘油的儲存緩沖液中。該溶液相當(dāng)黏稠,難以用移液器進(jìn)行準(zhǔn)確吸加。辦法是用離心機(jī)將盛有酶的離心管在4'C高速離心10s,然后用正排量移液器吸取所需酶量。
●自動移液器。自動微量移液器再配以帶濾芯的吸頭是PCR實(shí)驗(yàn)的*工具。帶有隔水屏障的一次性帶濾芯的吸頭可防止樣品液體不小心流入微量移液器,同時減少PCR與DNA樣品在實(shí)驗(yàn)過程中存在交叉污染的可能性。
一:移液槍使用訣竅
1. 影響移液槍精度因素
(1)溫度:室溫低時,手溫較高,使得空氣膨脹,吸入冷溶液時往往發(fā)生誤差
(2)氣密性:tip和槍體的結(jié)合部,以及槍內(nèi)柱體之間的長期磨損,造成誤差
(3)吸速:容易造成tip內(nèi)氣泡產(chǎn)生,而且會污染槍頭
(4)試劑的揮發(fā):吸揮發(fā)性高的試劑時,蒸汽進(jìn)入槍頭,內(nèi)壓增高,結(jié)果在壓出液體時,壓力變大
2. 使用注意事項(xiàng)
(1)吸取液體時一定要緩慢平穩(wěn)地松開拇指
(2)為獲得較高的精度
(3)濃度和粘度大的液體
(4)可用分析天平稱量所取純水的重量并進(jìn)行計(jì)算的方法,來校正取液器,1mL蒸餾水20℃時重0.9982g。
(5)移液器反復(fù)撞擊吸頭來上緊的方法是非常不可取的,長期操作會使內(nèi)部零件松散而損壞移液器。
(6)移液器未裝吸頭時,切莫移液。
(7)在設(shè)置量程時,請注意?旋轉(zhuǎn)到所需量程?數(shù)字清清楚楚在顯示窗中?所設(shè)量程在移液器量程范圍內(nèi)不要將按鈕旋出量程
(8)移液器嚴(yán)禁吸取有強(qiáng)揮發(fā)性
(9)嚴(yán)禁使用移液器吹打混勻液體
(10)不要用大量程的移液器移取小體積的液體
二、移液器錯誤操作及處理方法
做為液體操作中常用的手動可調(diào)精密移液器
錯誤:裝配吸頭時用移液器反復(fù)撞擊吸頭
正確:插入吸頭
分析:撞擊會造成移液器內(nèi)部齒輪組合的松動,長期操作會對移液器的性造成影響
錯誤:吸頭與移液器不匹配
分析:吸頭的不匹配
錯誤:吸液時
正確:垂直吸液
分析:傾斜的狀態(tài)會造成氣壓面的改變。會對移液精度造成影響
錯誤:吸頭內(nèi)含有未打出的液體時
正確:將移液器垂直掛在移液器支架上
分析:吸頭內(nèi)含有未打出液體
錯誤:用大量程的移液器移取小體積的液體
正確:移液體積需保證在移液器所提供的量程范圍之內(nèi)才符合不準(zhǔn)確度和不準(zhǔn)確的要求
分析:因?yàn)榭諝鈮|的存在
錯誤:吸取具有強(qiáng)揮發(fā)性的液體
正確:不建議用普通移液器做強(qiáng)揮發(fā)型液體轉(zhuǎn)移
分析:如果一定要移取強(qiáng)揮發(fā)性的液體
錯誤:吸液速度和放液速度過快
正確:慢吸慢放
分析:快吸對于1mL及以上量程的移液器
本生(天津)健康科技有限公司供應(yīng):全系熒光定量PCR耗材