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如何科學(xué)正確地使用凍存管呢 凍存管的使用是一門學(xué)問，并不是打開液氮罐 凍存管有IATA航空運輸協(xié)會標(biāo)準(zhǔn)測試證書 冷凍步驟: 用預(yù)熱的PBS溶液洗滌細胞，吸取溶液 37℃孵育細胞3-5分鐘 細胞從底部脫離之后 離心細胞懸液(500 x g, 5分鐘)，用含有血清的培養(yǎng)基重新懸浮 細胞計數(shù) 離心細胞懸液(500 x g, 5分鐘)，去除上清液 以1:1體積比混合細胞和凍存液(60%培養(yǎng)基，20%胎牛血清 含有細胞的凍存管建議以−1 K / min 的速率降溫 然后轉(zhuǎn)移凍存管到液氮罐 解凍步驟: 從液氮罐取出凍存的細胞后立即置于37℃水浴搖晃Cryo.sTM凍存管1-2分鐘 轉(zhuǎn)移解凍的細胞于15 mL離心管 500 x g離心細胞5 分鐘 按照建議的細胞濃度接種。 接下來的12小時細胞進入靜默期 間隔24小時和48小時更換培養(yǎng)基 如果細胞感染了病毒 凍存管安全操作建議 凍存管用來存儲樣品 因此 進行冷凍保存時，凍存管需要緩慢地降溫至冷凍溫度。如果不是緩慢地降溫到冷凍溫度，將導(dǎo)致冰塞形成(如在凍存管頂部)，冰塞將阻礙液體形成凝固，將導(dǎo)致高壓力危險和后續(xù)的爆管風(fēng)險。 上一篇：本生闡述：怎樣正確使用移液槍? 技術(shù)支持：化工儀器網(wǎng) 管理登陸 網(wǎng)站地圖？、放入凍存管、關(guān)上液氮罐這樣簡單的三部曲可以完成的?div id="jfovm50" class="index-wrap">？茖W(xué)正確地使用凍存管，可以避免樣本的損失，并保護試驗人員的安全 。 ，常規(guī)儲存細胞培養(yǎng)物，組織樣品，微生物樣品(如病毒，細菌，酵母，真菌，孢子等)，人源或動物源其它生物樣品(如血液，血清，精液，抗體，RNA, DNA和蛋白樣本)，不適合存儲再生醫(yī)學(xué)樣本。，含有胰蛋白酶和EDTA的溶液覆蓋細胞(薄薄的液層足夠，胰蛋白酶和EDTA的濃度需要根據(jù)細胞系確定)。。，終止孵育，加入含有血清的培養(yǎng)基，用移液器輕輕地懸浮細胞。。。，用適量體積的含有血清的培養(yǎng)基重新懸浮細胞。，20% DMSO)，然后轉(zhuǎn)移到凍存管中。凍存的細胞密度為 1-5×106 個/毫升。 ，可以將凍存管置于−70℃含有異丙醇的容器中。如果凍存管存儲其他樣品 ，可以直接放置在−20℃ ，−70℃或者液氮的氣相。為了確保樣品冷凍均勻 ，4 mL和5 mL的凍存管需要先置于在−20℃冰箱過夜 ，然后再轉(zhuǎn)移到−70℃或者液氮的氣相。 。為了避免污染(如支原體)和安全考慮 ，請將凍存管置于液氮的氣相，切勿置于液相 。 。解凍過程需要越快越好。 ，立即用大量的含有血清的細胞培養(yǎng)基混勻 。 ，去除上清液，用適量的含有血清的細胞培養(yǎng)基重新懸浮細胞 ，然后轉(zhuǎn)移到細胞培養(yǎng)瓶 。 。 ，也可以參考以上步驟進行冷凍存儲和解凍的操作。，只能置于液氮氣相或冰箱。禁止凍存管浸沒于液氮液相，否則液氮可能滲入凍存管。因此，解凍時，蒸發(fā)的液氮產(chǎn)生高壓力
，終導(dǎo)致凍存管炸裂，并且還將導(dǎo)致感染物質(zhì)釋放
。
，操作凍存管時需要佩戴合適的個人安全防護措施，如穿戴安全護服、佩戴護目鏡、在安全櫥操作。
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