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本生詳解抗體的制備方法與原理
抗血清的制備
有了質(zhì)量好的抗原 (一)用于免疫的動物 作免疫用的動物有哺乳類和禽類 (二)免疫途徑 免疫途徑有多種多樣，如靜脈內(nèi)、腹腔內(nèi)、肌肉內(nèi)、皮內(nèi)、皮下、淋巴結(jié)內(nèi)注射等，般常用皮下或背部多點(diǎn)皮內(nèi)注射，每點(diǎn)注射0.1ml左右。途徑的選擇決定于抗原的生物學(xué)特性和理化特性，如激素 (三)佐劑 由于不同個體對同抗原的反應(yīng)性不同 佐劑除了延長抗原在體內(nèi)的存留時間 常用的佐劑是福氏佐劑(Freund adjuvant),其成分通常是羊毛脂1份、石臘油5份，羊毛脂與石臘油的比例，視需要可調(diào)整為1：2～9(V/V)，這是不*福氏佐劑，在每毫升不*佐劑加入1～20mg卡介苗就成為*佐劑。 配制方法：按比例將羊毛脂與石蠟油置容器內(nèi)，用超聲波使之混勻，高壓滅菌，置4℃下保存?zhèn)溆?div id="4qifd00" class="flower right"> (四)免疫方法 抗原劑量，次劑量為300～500μg，加強(qiáng)免疫的劑量約為次劑量為1/4左右。每2～3周加強(qiáng)免疫次。加強(qiáng)免疫時用不*佐劑，次免疫時皮下注射百日咳疫苗0.5ml，加強(qiáng)免疫時不必注射百日咳疫苗。 在第2次加強(qiáng)免疫后2周，從耳緣靜脈取2～3ml血，制備血清，檢測抗體效價(見后)。如未達(dá)到預(yù)期效價，需再進(jìn)行加強(qiáng)免疫，直到滿意時為止(圖2-3)。當(dāng)抗體效價達(dá)到預(yù)期水平時，即可放血制備抗血清。 抗體的制備方法與原理先和大家介紹到這，如果想要了解更多抗體的信息，可以關(guān)注天津本生生物，本生業(yè)給生物醫(yī)藥客戶提供生物實(shí)驗室檢測耗材,試劑，歡迎廣大客戶來詢。 技術(shù)支持：化工儀器網(wǎng) 管理登陸 網(wǎng)站地圖 ，還必須選擇適當(dāng)?shù)拿庖咄緩剑拍墚a(chǎn)生質(zhì)量好(特異性強(qiáng)和效價高)的抗體 。 ，主要為羊 、馬 、家兔、猴 、豬 、豚鼠、雞等 ，實(shí)驗室常用者為家兔、山羊和豚鼠等 。動物種類的選擇主要根據(jù)抗原的生物學(xué)特性和所要獲得抗血清數(shù)量 ，如般制備抗r-免疫球蛋白抗血清，多用家兔和山羊，因動物反應(yīng)良好，而且能夠提供足夠數(shù)量的血清，用于免疫的動物應(yīng)適齡，健壯，無感染性疾患，-好為雄性，此外還需十分注意動物的飼養(yǎng)，以消除動物的個體差異以及在免疫過程中死亡的影響。若用兔，-好用純種新西蘭兔，組三只，兔的體重以2～3kg為宜。 、酶 、毒素等生物學(xué)活性抗原，般不宜采用靜脈注射 。 ，而且不同抗原產(chǎn)生免疫反應(yīng)的能力也有強(qiáng)有弱 ，因此常常在注射抗原的同時 ，加入能增強(qiáng)抗原的抗原性物質(zhì)，以刺激機(jī)體產(chǎn)生較強(qiáng)的免疫反應(yīng) ，這種物質(zhì)稱為免疫佐劑 。 ，增加抗原刺激作用外 ，更主要的是，它能刺激網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)
，使參與免疫反應(yīng)的免疫活性細(xì)胞增多
，促進(jìn)T細(xì)胞與B細(xì)胞的相互作用
，從而增強(qiáng)機(jī)體對抗原的細(xì)胞免疫和抗體的產(chǎn)生
。。免疫取等容積*或不*佐劑與免疫原溶液混合，用振蕩器混勻成乳狀，也可以在免疫取需要量佐劑置乳缽中研磨，均勻后再邊磨邊滴加入等容積抗原液(其中加卡介苗3～4mg/ml或不加)，加完后再繼續(xù)研磨成乳劑，滴于冰水上5～10min內(nèi)*不擴(kuò)散為止。為避免損失抗原，亦可用注射器裝抗原液，另注射器裝佐劑，二者以聚乙烯塑料管連接，然后二者來回反復(fù)抽吸，約數(shù)十分鐘后即能*乳化。檢查合格后即以其中注射器作注射用。
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