,非特異性結(jié)合的程度隨著個(gè)別蛋白結(jié)構(gòu)的不同而不同,含有帶電的或者疏水結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)更易于不可逆結(jié)合到不同表面
。
低吸附離心管離心時(shí)注意事項(xiàng):避免過(guò)長(zhǎng)時(shí)間或者高速離心
,雖然我們產(chǎn)品有防死端設(shè)計(jì),可避免過(guò)度離心造成膜表面干燥而造成不可逆吸附
,避免過(guò)度濃縮
,終體積越小,越容易因表面吸附而損失得率
,離心后采用輕輕吹吸幾次濾膜截留的溶液
,必要時(shí)補(bǔ)加一定體積的緩沖液沖洗膜表面,有助于減少膜表面吸附
,能提高回收率
,盡量避免TIPS接觸膜表面。
對(duì)于
低吸附離心管表面做鈍化預(yù)處理可降低蛋白質(zhì)在膜表面的吸附性損失,大多數(shù)情況下
,在濃縮稀釋蛋白溶液之前預(yù)處理柱子可以提高回收率
,因?yàn)槿芤嚎商顫M膜和表面暴露的空白蛋白吸附位點(diǎn),鈍化的方法是預(yù)先用高容積的鈍化溶液預(yù)浸泡柱子一小時(shí)以上
,蒸餾水*沖洗柱子
,再用蒸餾水離心一次以*除去可能殘留在膜上的鈍化溶液,注意鈍化處理后別讓膜干了
,如果要留待以后使用
,需要加無(wú)菌蒸餾水保持膜濕潤(rùn)。