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本生解析：培養(yǎng)細(xì)胞需注意的細(xì)節(jié)?
培養(yǎng)細(xì)胞就像養(yǎng)育孩子一樣，要精心照料
，用心呵護(hù)。每天都去看看它們，滿足它們所需要的物質(zhì)需求那培養(yǎng)細(xì)胞都要注意哪些小細(xì)節(jié)呢?就讓我們一起來看看吧!
1.細(xì)胞生長的營養(yǎng)來源
不同的細(xì)胞的培養(yǎng)基是不相同的
Q：細(xì)胞培養(yǎng)基配方如何選擇?
A: 一般購買細(xì)胞時(shí)，針對不同的細(xì)胞株
Q：如果細(xì)胞生長緩慢，需要增加血清比例嗎?
A：可以
2.細(xì)胞生長的環(huán)境
舒適無菌的環(huán)境是細(xì)胞健康生活的重要基礎(chǔ)
Q：細(xì)胞培養(yǎng)板及培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶如何選擇?
A：根據(jù)不同的應(yīng)用選擇不同的培養(yǎng)皿或容量板，如MTS用96孔板
，細(xì)胞爬片用24孔，流式分析用6空等而選擇培養(yǎng)皿還是選擇培養(yǎng)瓶，就細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)來說差別不大
，主要是培養(yǎng)瓶的安全系數(shù)更高一些，數(shù)量也會大一些，但是成本也相對較高，因此沒有特殊要求時(shí)，一般用培養(yǎng)皿即可。Q：血清是否要滅活處理
，保證環(huán)境無菌?A：這取決于您的應(yīng)用
。滅活過程中，會導(dǎo)致血清中某些成分被破壞
，如氨基酸，維生素，生長因子等。所以只有在您的實(shí)驗(yàn)對血清有特殊要求時(shí)，才會考慮對血清進(jìn)行滅活處理。如您的實(shí)驗(yàn)對血清中的某種組分敏感，需要去除該組分。常見的情況是需要去除血清中的補(bǔ)體蛋白，因?yàn)檠a(bǔ)體在機(jī)體中參與細(xì)胞殺傷，巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞活化3.細(xì)胞復(fù)蘇與凍存
細(xì)胞復(fù)蘇是指將凍存的細(xì)胞解凍之后再重新培養(yǎng)
Q：細(xì)胞復(fù)蘇后
A：忽略培養(yǎng)基的問題
細(xì)胞凍存則是將細(xì)胞放在低溫(-70℃~196℃)環(huán)境
，降低細(xì)胞內(nèi)的代謝活動，限度的保存細(xì)胞活力，以便長期存儲。Q：目前細(xì)胞凍存液多采用的什么配方?
A：目前細(xì)胞凍存多采用DMSO二甲基亞砜或甘油作保護(hù)劑
，細(xì)胞凍存液的配方有很多種，如培養(yǎng)基：血清：DMSO=7:2:1或8：1：1或5：4：1，或直接用血清：DMSO=9:1，一般高濃度血清有助于維護(hù)細(xì)胞活力，復(fù)蘇存活率在80%～90%以上。4.細(xì)胞的傳代培養(yǎng)
細(xì)胞在培養(yǎng)過程中不斷增殖
，培養(yǎng)皿空間有限，細(xì)胞過密生長就會受到抑制，影響細(xì)胞的狀態(tài)，因此我們要把細(xì)胞中的一部分分到別的培養(yǎng)皿里，這樣細(xì)胞才能生長的好。Q：細(xì)胞傳代培養(yǎng)為什么要選擇對數(shù)期細(xì)胞?
A: 細(xì)胞的生長和分裂
，一般遵循以下模式：停滯期，對數(shù)期(指數(shù)期)，平穩(wěn)期(平臺期)和衰退期。為了確保活力，遺傳穩(wěn)定性和表型穩(wěn)定，必須使細(xì)胞保持在對數(shù)期。一般細(xì)胞長到70%~80%左右就可以傳代了。除了上述幾個(gè)環(huán)節(jié)的關(guān)節(jié)問題外
，細(xì)胞培養(yǎng)還有很多小問題如下：Q：培養(yǎng)基多久換一次?
A: 正常情況下，培養(yǎng)液偏紅色
。如果細(xì)胞維持在pH6.5～6.6條件下，培養(yǎng)基變黃，說明培養(yǎng)液中代謝產(chǎn)物已堆積到一定量，細(xì)胞會脫落死亡，需要更換新鮮培養(yǎng)液。一般細(xì)胞生長旺盛時(shí)1～2天換一次，生長緩慢時(shí)Q：血清應(yīng)如何融解?
A：從冰箱中取出血清
Q：如果細(xì)胞形態(tài)不清晰或有異物等，如何處理?
A：可以考慮如下操作：首先
Q：血清中出現(xiàn)絮狀沉淀是否需要去除?如何去除?
A：多種原因可能導(dǎo)致絮狀沉淀的形成
，常見的原因之一是融化過程中，脂蛋白聚集所致。該現(xiàn)象一般不會影響產(chǎn)品質(zhì)量?div id="d48novz" class="flower left">總之
，細(xì)胞培養(yǎng)是后續(xù)實(shí)驗(yàn)的基石，留心各種細(xì)節(jié)問題，嚴(yán)守滅菌處理的程序，保護(hù)好自己養(yǎng)的細(xì)胞，這樣才能快樂地進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。培養(yǎng)細(xì)胞需注意哪些小細(xì)節(jié)?本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升
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