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如何正確使用96孔PCR孔板
PCR板有透明和乳白色可選
,其中乳白色更適合用于頂部采集熒光信號的新型熒光定量PCR儀(如伯樂CFX系列,ABI 7500fast 以上型號BUNSEN本生PCR板根據(jù)裙邊設(shè)計(jì)又可分為無裙邊
、半裙邊和全裙邊三種設(shè)計(jì)模式,不同廠家的熒光定量PCR儀會設(shè)計(jì)不同的切角或邊緣凸起,請選擇適合該P(yáng)CR儀的板子PCR板又分100ul體積(矮板)和200ul體積(高板),根據(jù)機(jī)型的不同選擇
當(dāng)使用96孔板做熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)的時(shí)候
加樣后會在管壁上飛濺一些小液滴,另外反應(yīng)體系內(nèi)也會有一些氣泡
PCR板屬于一次性消耗品
,生產(chǎn)一次成型,不建議剪開使用容易造成實(shí)驗(yàn)誤差增加,不能清洗或部分重復(fù)利用。不要為了節(jié)省一點(diǎn)小錢,而給實(shí)驗(yàn)帶來后續(xù)分析上的困擾。樣本量少
,用8聯(lián)管做實(shí)驗(yàn)該注意哪些?8聯(lián)管也分乳白和透明兩種,選擇方式和孔板一樣
,根據(jù)PCR儀的熒光信號采集方式?jīng)Q定。BUNSEN本生8聯(lián)管同樣也有0.1ml(矮管)和0.2ml(高管),根據(jù)PCR儀的加熱模塊體積確定
。8聯(lián)管的蓋子一般有光學(xué)平蓋和凸型圓蓋之分
,光學(xué)平蓋適用于熒光定量PCR,圓蓋適用于普通PCR。使用單管或8聯(lián)管做實(shí)驗(yàn)
,并且樣本數(shù)量不多的時(shí)候,建議在樣品加熱塊(TRAY)上對稱地安放樣品,好是縱向放置,并且優(yōu)先放在第6列或第7列,然后逐漸向兩邊放置。這樣做的好處是熱蓋壓下來的時(shí)候不至于發(fā)生傾斜,各個反應(yīng)管的受力和受熱都比較均勻管蓋沒有蓋好造成PCR反應(yīng)液熱蒸發(fā)
如何正確使用96孔PCR孔板! 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命
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