是什么影響了ELISA試劑盒質(zhì)保,您知道嗎?
ELISA試劑盒為什么蛻變?是什么影響了ELISA試劑盒質(zhì)保?一旦蛻變會有什么影響呢?以下便是天津本生生物的詳述,不放來看看。
1.辦法學(xué)的影響
ELISA測定形式包含以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法
、IgM抗體捕捉法
、競爭抑制法
,其間競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等選用)因受操作時(shí)差所引起的競爭等要素的影響
,成果重復(fù)性較差
,質(zhì)量較難操控
。
2.試劑要素
不同批次的ELISA試劑在制作進(jìn)程中很難保證質(zhì)量一致
,即使是通過批批檢的項(xiàng)目其檢測成果也存在差異
,因而必須挑選和訂購長批號的試劑
,并保證保存條件
。嚴(yán)格執(zhí)行這一規(guī)范可以防止因試劑批號改動(dòng)而從頭建立質(zhì)控體系及從頭評估試劑的雜亂進(jìn)程,并且能夠保證成果的穩(wěn)定性;關(guān)于效期短
、使用率低的試劑,應(yīng)當(dāng)小量分裝
,每次使用則取分裝部分即可
,防止重復(fù)凍融造成試劑的失效
。
3.樣本要素
標(biāo)本攪擾要素包含內(nèi)源性攪擾要素和外源性攪擾要素,前者包含類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體
、異嗜性抗體
、本身抗體
、溶菌酶等
,后者包含標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染
、標(biāo)本貯存時(shí)刻過長、標(biāo)本凝結(jié)不全
、冷凍標(biāo)本的重復(fù)凍融等
。
4.操作要素
ELISA操作步驟雜亂 ,操作不當(dāng)將引起較大的差錯(cuò)
。加樣、溫育
、洗刷
、顯色、比色
。
5.灰區(qū)的設(shè)置
通常情況下,ELISA定性試驗(yàn)以“陽性"和“陰性"來報(bào)告成果,兩者間有一條分界線被稱為“陽性判別值"(cut-off value
,CO值),這是定性免疫測定成果報(bào)告的根據(jù)
。
6.標(biāo)本復(fù)查
ELISA手工檢測進(jìn)程雜亂,影響要素較多
,即使室內(nèi)質(zhì)控在控,也或許因孔間差異而造成成果的差異
,因而加大復(fù)查力度是保證成果準(zhǔn)確性的牢靠辦法,比如對HBsAg
、HBeAg
、HCV-Ab
、HIV-Ab、TP-Ab等項(xiàng)目的可疑
、弱陽性標(biāo)本及罕見形式的檢測成果進(jìn)行復(fù)查。
7.常表明成果的常用辦法
a.定性測定
b.半定量測定 成果一般以滴度表明 。
c.定量測定 即用已知量的規(guī)范品作一系列稀釋后進(jìn)行ELISA測定 ,制作規(guī)范曲線,成果以肯定量或單位表明
。在ELISA定量檢測中每一塊反應(yīng)板都必須制作相應(yīng)的規(guī)范曲線
。