,應(yīng)該再次離心
。
3.尿液:用無菌管收集
,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清
,保存過程中如有沉淀形成
,應(yīng)再次離心。胸腹水
、腦脊液參照實(shí)行
。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集
。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)
。仔細(xì)收集上清
。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液
,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右
。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份
。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)
。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成
,應(yīng)再次離心
。
5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量
。加入一定量的PBS
,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?div id="d48novz" class="flower left">
。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度
。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分
。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)
。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)
,其余冷凍備用
。
6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行
,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)
。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存
,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7.不能檢測(cè)含NaN3的樣品
,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。