聯(lián)系電話：
18502669006
服務(wù)熱線： 15502280048
服務(wù)熱線： 
超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase, SOD）試劑盒說明書（WST-8法）
分光光度法50管/48樣 天津本生
正式測定務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義：
SOD（EC 1.15.1.1）廣泛存在于動物
測定原理：
通過huangpl及huangpl氧化酶反應(yīng)系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子(O2-.)，O2-.可與WST-8反應(yīng)產(chǎn)生水溶性染料甲臜
組成：
產(chǎn)品名稱 | SR010-50T/48S | Storage |
提取液：酸性提取液 | 60ml | 4℃ |
試劑一：液體 | 50ml | 4℃避光 |
試劑二：液體 | 300μl | 4℃避光 |
試劑三：液體 | 100μl | 4℃ |
試劑四：粉劑 | 2瓶 | 4℃ |
說明書 | 一份 | |
自備儀器和用品：
分光光度計
粗酶液提?div id="jfovm50" class="index-wrap">。?/strong>
1
細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內(nèi)
組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液）
2
測定步驟：
1
2
3、 工作液配制：在試劑一加入250μl試劑二
4
5
試劑名（μl） | 測定管 | 對照管 |
樣本 | 50 | |
蒸餾水 | 50 | |
試劑三（稀釋后） | 50 | 50 |
工作液 | 800 | 800 |
試劑四 | 100 | 100 |
充分混勻
注意事項:
1
2、對照管只需要做一管
。3
、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數(shù)值在什么范圍對照管的范圍是0.8-2 若出現(xiàn)測定管大于對照管 SOD活性計算： 1、抑制百分率的計算 抑制百分率＝(A對照管－A測定管) ÷A對照管× 100% 盡量使樣本的抑制百分率在10-90%范圍內(nèi) 2 3 （1）血清（漿）SOD活性(U/ml)=[抑制百分率÷(1－抑制百分率)×V反總]÷V樣=20×抑制百分率÷(1－抑制百分率) （2）組織、細菌或培養(yǎng)細胞SOD活力計算： a.按樣本蛋白濃度計算 SOD活性(U/mg prot)=[抑制百分率÷(1－抑制百分率)×V反總]÷(V樣×Cpr) =20×抑制百分率÷(1－抑制百分率)÷Cpr 需要另外測定 b.按樣本鮮重計算 SOD活性(U/g 鮮重)=[抑制百分率÷(1－抑制百分率)×V反總]÷(W ×V樣÷V樣總)=20×抑制百分率÷(1－抑制百分率)÷W c.按細菌或細胞個數(shù)計算 SOD活力(U/104 cell)=[抑制百分率÷(1－抑制百分率) ×V反總]÷(500×V樣÷V樣總) =0.04×抑制百分率÷(1－抑制百分率) V反總：反應(yīng)體系總體積，1ml 技術(shù)支持：化工儀器網(wǎng) 管理登陸 網(wǎng)站地圖 。對照管吸光值過低可能是（1）試劑三活性低 ，可以適當(dāng)減少稀釋倍數(shù) ；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時間不夠 ，可以延長反應(yīng)時間（反應(yīng)時間30min可以延長到40min） 。對照管吸光值過高可能是試劑三未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。 ，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大 ，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測 ，通常可以使測定正常 。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù) 。 。如果計算出來的抑制百分率小于10%或大于90% ，則通常需要調(diào)整加樣量后重新測定。如果測定出來的抑制百分率偏高 ，則需將樣本用提取液適當(dāng)稀釋 ；如果測定出來的抑制百分率偏低，則需重新準(zhǔn)備濃度比較高的待測樣本 。 、SOD酶活性單位：在上述huangpl氧化酶藕聯(lián)反應(yīng)體系中抑制百分率為50%時，反應(yīng)體系中的SOD酶活力定義為一個酶活力單位(U/ml) 。 、SOD酶活性計算： ，建議使用本公司BCA蛋白質(zhì)含量測定試劑盒
。
；V樣：加入反應(yīng)體系中樣本體積
，0.05ml；V樣總：加入提取液體積，1 ml；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml ；W：樣本質(zhì)量，g；500：細胞或細菌總數(shù)，500萬。
本生（天津）健康科技有限公司 版權(quán)所有 備案號：津ICP備19006588號-1
