飽和酚是分子生物學(xué)等實(shí)驗(yàn)的重要實(shí)驗(yàn)品,常用于樣本中DNA的提取、
RNA的提取等
。
飽和酚在核酸純化中有2種,一種為Tris飽和酚,故也稱為堿性酚
,另一種就是酸性酚,也就是水飽和酚
(表
1)表1 飽和酚參數(shù)
名稱 |
別名 |
pH
|
外觀 |
用途 |
水飽和酚
|
水平衡酚 |
<5.0 |
無色分層溶液 |
RNA提取 |
Tris飽和酚 |
Tris平衡酚 |
>7.8 |
黃色分層溶液 |
DNA提取 |
試劑成分的作用:
(1)用于RNA提取時(shí),則要制備酸性酚
,也就是水飽和酚,因?yàn)樵谒嵝詶l件下
,
RNA被分配于水相
,而
DNA在有機(jī)相,從而達(dá)到分離獲得
RNA的目的
。水飽和酚同時(shí)能使蛋白質(zhì)變性
、沉淀,從核酸提取液中將蛋白質(zhì)分離除去
。
(2)用于DNA提取時(shí),酚是強(qiáng)的蛋白變性劑,可以使細(xì)胞或組織中的蛋白質(zhì)變性析出
。 而Tris的主要作用是防治止酚類氧化
,若酚類氧化,則會(huì)形成醌(兩個(gè)苯環(huán))
,醌含有強(qiáng)自由基
,會(huì)破壞核酸結(jié)構(gòu)。 同時(shí)
,由于PH值大于7
,在堿性環(huán)境中DNA處于水相,RNA處于有機(jī)相
。從而分離上清
。
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