本生知識分享—ELISA試劑盒檢測注意事項匯總

　　以下是本生技術(shù)小編總結(jié)：影響ELISA檢測的關(guān)鍵因素

，也是眾多ELISA 用戶在實驗中經(jīng)常遇到的問題及解決方案：

　　Q1：為什么所有試劑和檢測樣本要平衡至室溫后再進行加樣操作?

　　A1：溫度是ELISA結(jié)合反應(yīng)的重要影響因素。為了使所有樣本在一致的溫度下反應(yīng)，實驗前務(wù)必將所有試劑平衡至室溫，包括檢測樣本

。避免因溫度的動力學反應(yīng)差異而導致ELISA檢測結(jié)果的不準確。

　　Q2：為什么標準曲線線性較差?

　　A2：按照推薦方式保存標準品;溶解標準品之前需短暫離心

，收集粉末;確保標準品溶解和混勻(大約10min)，然后再進行后續(xù)的系列稀釋步驟，確保每一步都充分混勻且精確移液;顯色的恰當終止;選擇合適的數(shù)學擬合方程繪制標準曲線。

　　Q3：ELISA實驗為什么必須設(shè)置復孔?

　　A3：為獲得更準確的實驗結(jié)果，強烈建議標準品及樣本進行復孔檢測

。

　　因為復孔檢測可以：

　　★計算平均值

，確保實驗結(jié)果更準確;

　　★解決實驗中誤操作造成的跳孔現(xiàn)象;

　　★計算CV值，對實驗的操作和試劑盒的精密度進行評估

。

　　Q4：為什么實驗過程中孵育

、洗滌需要振蕩?如何振蕩?

　　A4：振蕩孵育使反應(yīng)更充分，振蕩洗滌使背景更干凈

。建議使用酶標專用96孔微孔板振蕩器。

　　孵育過程振蕩，可以加快

、加強抗原抗體間的相互碰撞接觸，使得反應(yīng)過程更加，OD值通常會比未振蕩孵育的結(jié)果要高;洗滌過程振蕩，可以使洗板更干凈