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本生一秒帶您看懂——酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)
酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)是的標記免疫分析技術之一。
它基于一種酶標記抗體
ELISA的主要類型
根據(jù)抗原固定策略、抗體標記策略以及抗體-抗原反應類型(直接識別或競爭)的不同
，ELISA可以分為：直接法、間接法
、夾心法、競爭法。
直接法ELISA
直接法ELISA是的ELISA形式
?div id="d48novz" class="flower left">由于只涉及一個抗體
，所以直接法ELISA適用于樣品中抗原的定性或定量檢測、抗體篩選和表位基因圖譜。這種方法沒有交叉反應的二抗，可以在更短的時間內進行檢測。然而，一抗的免疫反應可能會受到酶標記的不利影響。標記的一抗不常用，因此使用直接法ELISA時，需要為每個特定的ELISA系統(tǒng)標記一抗
間接法ELISA
間接法ELISA檢測是在直接法ELISA的基礎上添加一個標記二抗進行檢測，是目前的ELISA形式
與直接法ELISA類似
，間接法ELISA可用于抗體篩選、表位基因圖譜和蛋白質定量檢測。二抗的作用是增強一抗的信號，使間接ELISA比直接ELISA更敏感。然而，它也會產生更高的背景信號，并可能降低整體信號。
夾心法ELISA
夾心法ELISA是最有用的免疫測定形式之一
，它設計用于檢測可溶性抗原。根據(jù)使用的抗體數(shù)量，該ELISA有兩種形式。兩者的原理是相同的，一種是直接將抗原固定在固相上，另一種是將捕獲抗體固定在固相上以捕獲抗原。? 直接夾心法ELISA(圖3a)中
? 間接夾心法ELISA(圖3b)中
這種方法適用于抗原被其他蛋白質污染或低濃度時
競爭法ELISA
直接法ELISA是的ELISA形式
上述系統(tǒng)是ELISA的基本配置
。所有這些都可以適用于使用競爭或抑制條件測量抗原或抗體，如圖4所述將可能含有抗原的未知樣品與含有已知量純化抗原的類似樣品進行比較時
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