，備有四種材質(zhì)的超濾膜：聚醚砜
、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart
，可根據(jù)不同要求靈活選用
使用注意事項(xiàng)：
(1)選擇合適的超濾管
。通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3
，比如目的蛋白分子量為35kDa，就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管
。若目的蛋白分子量為10kD左右
，則可以用截留分子量3kD的超濾管。認(rèn)真閱讀使用說(shuō)明書(shū)
，注意超濾膜對(duì)各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同
。
(2)新買來(lái)的超濾是干燥的，使用前加入超純水
，水量過(guò)膜
，冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出
，即可加入蛋白液
，加入的多少，以不超過(guò)管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)
。操作要輕
，加入蛋白液前，超濾管需要插在冰上預(yù)冷
。
(3)平衡
。質(zhì)量和重心二者都要達(dá)到平衡。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快
，否則直接損壞超濾膜
。開(kāi)始離心超濾(離心機(jī)預(yù)冷至4度)。不同離心機(jī)的轉(zhuǎn)速 rpm換算成g之后
，有所不同
。離心機(jī)的加速度調(diào)至檔
，減小對(duì)膜的壓力。注意
，一定要等離心機(jī)達(dá)到目的轉(zhuǎn)速之后
，方可離開(kāi)離心機(jī)，否則離心機(jī)出問(wèn)題時(shí)
，無(wú)法第一時(shí)間處理
。膜與轉(zhuǎn)軸的方向根據(jù)說(shuō)明書(shū)調(diào)整(角轉(zhuǎn)離心機(jī)的情況是膜與軸垂直)。在實(shí)際使用中
，一般轉(zhuǎn)速開(kāi)的比說(shuō)明書(shū)里的要低
，這樣可以延長(zhǎng)離心管的使用壽命。
(4)當(dāng)濃縮到剩下1ml時(shí)
，取50ul緩沖溶液
，加入10ul流穿，看有沒(méi)變藍(lán)色
，以此判斷超濾管是否漏掉蛋白
。如果管漏了，將上層和流穿重新倒入新管中開(kāi)始超濾
。要精確判斷是否漏管
，用5mgml的BSA離心10min，再取流穿
，跑蛋白膠或Bradford粗測(cè)
，繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作，防止蛋白受熱)
，直到所有濃縮液都加完為止
。離心過(guò)程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀，導(dǎo)致堵管
。若發(fā)生沉淀
，要確定沉淀的具體原因，是蛋白濃度過(guò)高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時(shí)超濾
，降低濃度的辦法解決
，后者的方法是換不同的
緩沖溶液，直到蛋白不發(fā)生沉淀為止
。
(5)前面幾步用以濃縮蛋白
，如果要換Buffer，在總蛋白液濃縮至1ml左右的時(shí)候
，輕輕加入新的Buffer(經(jīng)0.22um超濾膜超濾)
，再 濃縮至1ml左右，連續(xù)三次
，最后一次的濃縮終體積根據(jù)需要的蛋白濃度而定
，一般不多于500ul
，也有濃縮至200ul以內(nèi)的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算
，三次達(dá)到1000倍以上
，基本上可以達(dá)到換buffer的目的。
超濾離心管本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命
，追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升
。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀(jì)守法
，嚴(yán)于律己
，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)
，以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng)
，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏
，是我們的發(fā)展目標(biāo)
。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作
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