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豬游離血紅蛋白(F-Hb)ELISA試劑盒技術(shù)說明
檢測(cè)范圍：0.6μg/ml -22μg/ml
96T
使用目的： 豬游離血紅蛋白(F-Hb)ELISA試劑盒用于測(cè)定豬全血樣本中游離血紅蛋白(F-Hb)含量
。實(shí)驗(yàn)原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中豬游離血紅蛋白(F-Hb)水平
標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行
，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品
，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋
。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑
，其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測(cè)樣品 10μl(樣品最終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜
，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl
7. 溫育：操作同 3
8. 洗滌：操作同 5
9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl
10. 終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)
11. 測(cè)定：以空白孔調(diào)零
豬游離血紅蛋白操作程序總結(jié)：
計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)
注意事項(xiàng)
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用
，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出
，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器
，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在 5 分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線
6.底物請(qǐng)避光保存
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存：;2-8℃
2.有效期：6 個(gè)月
豬游離血紅蛋白(F-Hb)ELISA試劑盒本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命
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