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BUNSEN本生:ELISA試劑實驗細節(jié)盤點
ELISA試劑盒細節(jié)盤點
1. 樣本收集
每個標本量收集體積=100ulx檢測指標,如要做復孔,標本量收集體積=10Oul×檢測指標×2
。對收集后當天進行檢測的標本,儲存在4℃?zhèn)溆?div id="d48novz" class="flower left">2. ELISA加樣
加樣品時
,單孔用量要求: ≥50ul/指標,如需要做2個復孔則血量≥100ul/指標。如果樣本量不充足,具體用量可咨詢您的專屬銷售。3. 樣品捕獲抗體孵育
37C恒溫孵育
,避免溫度變化過大4. 洗滌
機洗: 將25x×洗滌緩沖液稀釋成1×
,1×洗滌緩沖液洗三次,每次加300uL浸泡60s手洗:手洗次數(shù)應比機洗次數(shù)多,浸泡時間也應適當延長手洗容易導致吸附在酶標板底部的試劑脫落
,從而導致結果偏小,手洗次數(shù)過多也會影響實驗結果5. 底物顯色(TMB顯色) 孵育
TMB在使用前應放置室溫平衡30分鐘
6. ELISA終止液終止反應
加完TMB終止液應讓其混勻再在酶標儀上讀數(shù)
7. 酶標儀讀數(shù)
在450nm波長處測定O.D值
8. 根據(jù)O.D值計算樣本濃度
使用軟件擬合標準曲線
ELISA試劑盒本生一直視質量控制為企業(yè)的生命
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