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ELISA實驗：哪些因素會導(dǎo)致ELISA實驗的假陽性
ELISA法對IgG、IgM都有很好的檢測能力，因其靈敏度高
多種因素可能會導(dǎo)致ELISA法本底偏高
1
(1)年齡因素
老年人容易出現(xiàn)免疫功能異常
(2)疾病因素
類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎
2
(1)標本處理不chedi
血液抽出后未wan全凝固而離心分離血清不能使纖維蛋白原wan全析出
(2)標本溶血
標本溶血時細胞內(nèi)液的各種活性酶以及具有酶活性的物質(zhì)與底物非特異性結(jié)合
，洗滌時不易洗去，催化底物產(chǎn)生一定的顯色反應(yīng)，使本底吸光度值偏高形成假陽性。(3)細菌污染
標本放置
、處置不當被細菌污染，一些細菌體內(nèi)可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶會對相應(yīng)的酶做標記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾，造成弱的假陽性反應(yīng)。3、操作因素
聚苯乙烯因其具有較長的吸附蛋白質(zhì)的性能而被廣泛用于ELISA試驗的固相載體
(1)加樣太快
(2)底物液反復(fù)使用被污染或被強光照射時間過長
(3)板要平整
(4)洗液溫度 實驗表明:洗液溫度也會影響洗板的干凈程度
洗液未注滿孔
，孔壁洗滌不干凈也易造成假陽性現(xiàn)象。(5)洗液要新鮮配置，洗液要臨用前新鮮配置
，放置時間過長易產(chǎn)生絮狀物或渾濁，造成賭孔導(dǎo)致假陽性。洗板次數(shù)不夠或洗滌間隔時間過短也會造成由于洗板不凈而造成假陽性
，孵育時間過長也會造成假陽性;由于樣本較多，加樣后未及時放入孵育箱，反應(yīng)板在室溫呆的時間過長，既間接增加了孵育時間，導(dǎo)致孵育時間過長。4
、儀器因素(1)酶標儀是垂直對反應(yīng)孔比色
，反應(yīng)孔底部污染時，出現(xiàn)反應(yīng)孔吸光度值偏高。(2)洗板拖尾現(xiàn)象
，洗板機在洗板過程中，出水針出水不暢，滴滴答答不間斷出現(xiàn)水滴，造成板上水過多，拍板不干凈。5
、方法學(xué)因素(1)廠家試劑盒，BUNSEN本生試劑盒 由于不同廠家的診斷試劑所包被的抗原配比以及抗原純度不盡一致
，造成靈敏度和特異性不同，因此也造成了假陽性的產(chǎn)生。三代免疫試劑盒只檢測抗體，被某些身體不明抗原干擾，導(dǎo)致的假陽性。(2)實驗灰區(qū)
，在陽性與陰性之間有一條明顯的分界線，作為陽性判定值(cutoff)來判定結(jié)果，一般把檢測值S/COV值在0.6-1范圍內(nèi)時作為灰區(qū)帶，因此當1(3)“鉤狀效應(yīng)"的產(chǎn)生
(4)酶標儀的波長選擇
，建議酶標儀比色時選擇雙波長，即敏感波長(主波長)和非敏感干擾波長(次波長)，zui后從儀器上得到的讀數(shù)為敏感波長與非敏感干擾波長之差，排除(板孔的劃痕、污跡)干擾。ELISA試劑盒 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命
，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標準，以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創(chuàng)美好的未來。技術(shù)支持：化工儀器網(wǎng) 管理登陸 網(wǎng)站地圖
