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BUNSEN快訊:ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中的封閉液等常用試劑的配制
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中的封閉液小知識(shí)
ELISA的試劑盒說(shuō)明上寫(xiě)封閉液用蔗糖溶液,一般是用BSA或酪蛋白的蛋白分子封閉空白位點(diǎn)
,蔗糖封閉的原理:1.ELISA實(shí)驗(yàn)中
,蔗糖本身沒(méi)有封閉作用;2.封閉液一般是BSA
、酪蛋白等或者是Tween等3.加蔗糖的主要目的是保護(hù)ELISA板子吸附(包被)的蛋白
4.蔗糖溶液一般在ELISA板子經(jīng)過(guò)BSA封閉后加
封閉劑還可用5%的脫脂乳(市售即可),0.4%的明膠
ELISA實(shí)驗(yàn)中緩沖溶液等試劑的配置
ELISA實(shí)驗(yàn)中是以抗原和抗體的免疫反應(yīng)為基礎(chǔ),ELISA試劑以及各種溶液如何配置?zui近剛做了下ELISA實(shí)驗(yàn)
1.ELISA實(shí)驗(yàn)包被緩沖液(PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液):
NaHCO3 1.59克
NaHCO3 2.93克
加蒸餾水至1000ml
2.ELISA實(shí)驗(yàn)洗滌緩沖液(PH7.4 PBS):0.15M
KH2PO4 0.2克
Na2HPO4·12H2O 2.9克
NaCl 8.0克
KCl 0.2克
Tween-20 0.05% 0.5ml
加蒸餾水至1000ml
3.ELISA實(shí)驗(yàn)稀釋液:
牛血清白蛋白(BSA) 0.1克
加洗滌緩沖液至100ml
或以羊血清
4.ELISA實(shí)驗(yàn)終止液(2M H2SO4):
蒸餾水178.3ml
5. ELISA底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):
0.2M Na2HPO4(28.4克/L) 25.7ml
0.1M 檸檬酸(19.2克/L) 24.3ml
加蒸餾水50ml。
6.ELISA實(shí)驗(yàn)TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液:
TMB(10mg/5ml無(wú)水乙醇) 0.5ml
底物緩沖液(PH5.5) 10ml
0.75%H2O2 32μl
7.ELISA實(shí)驗(yàn)ABTS使用液:
ABTS 0.5mg
底物緩沖液(PH5.5) 1ml
3%H2O2 2μl
8.ELISA實(shí)驗(yàn)封閉液:
牛血清白蛋白(BSA) 5克
加洗滌緩沖液至100ml
值得一提的是有的封閉液中含有脫脂奶粉
ELISA試劑盒 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命
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