聯(lián)系電話：
18502669006
服務熱線： 15502280048
服務熱線： 
ELISA實驗—試劑盒實驗基本知識點
基本類型:
酶聯(lián)免疫吸附試驗 (以下簡稱ELISA) ：是酶免疫測定技術(shù)中應用的技術(shù)。其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體 ( 聚苯乙烯微量反應板 ) 表面
用途:
根據(jù)ELISA所用的固相載體而區(qū)分為三大類型：一是采用聚苯乙烯微量板為載體的ELISA，即我們通常所指的ELISA(微量板ELISA);另一類是用硝酸纖維膜為載體的ELISA,稱為斑點ELISA(Dot-ELISA);再一類是采用疏水性聚脂布作為載體的ELISA
操作程序:
1、間接ELISA
本法主要用于檢測抗體
(1) 材料
① 包被液
?div id="jfovm50" class="index-wrap">、?DVH包被抗原、酶標抗抗體
?div id="jfovm50" class="index-wrap">、?ELISA檢測儀、加樣器
(2) 方法步驟
① 加抗原包被 → 4℃過夜
② 加待檢血清 → 37℃ 2小時
③ 加酶標抗體 → 37℃ 2小時
④ 加底物液 → 37℃ 30分鐘
?div id="m50uktp" class="box-center"> 、?用ELISA檢測儀測定OD值，并計算出P/N比值
(3) 結(jié)果判定 已知陽性血清與已知陰性血清的比值(P/N)≥2.1
2
本法主要用于檢測大分子抗原。現(xiàn)以檢測雞傳染性法氏囊病病毒(IBDV)的雙夾心抗體ELISA為例介紹本法的操作程序
?div id="jpandex" class="focus-wrap mb20 cf">、?加抗體包被 → 4℃過夜，洗滌三次
?div id="jpandex" class="focus-wrap mb20 cf">、?加待檢抗原 → 37℃ 30分鐘，洗滌三次
?div id="jpandex" class="focus-wrap mb20 cf">、?加酶標抗體 → 37℃ 30分鐘，洗滌三次
?div id="jpandex" class="focus-wrap mb20 cf">、?加底物液 → 37℃ 15分鐘，加終止液
?div id="jpandex" class="focus-wrap mb20 cf">、?用ELISA檢測儀測定OD值
3、雙夾心ELISA
此法與雙抗體夾心ELISA的主要區(qū)別在于：它是采用酶標抗抗體檢查多種大分子抗原
，它不僅不必標記每一種抗體，還可提高試驗的敏感性。此法的基本程序為：
?div id="4qifd00" class="flower right">
?div id="4qifd00" class="flower right">
?div id="m50uktp" class="box-center"> 、?加用非同種動物生產(chǎn)的特異性抗體(Ab-2)→ 37℃ 60分鐘
?div id="m50uktp" class="box-center"> 、?加入酶標抗Ab-2抗體(AB-3)→ 37℃ 60分鐘
?div id="m50uktp" class="box-center"> 、?加底物液 → 37℃ 20分鐘
?div id="m50uktp" class="box-center"> 、?用ELISA檢測儀測定OD值。
4
此法主要用于測定小分子抗原及半抗原
其基本程序為：
?div id="m50uktp" class="box-center"> 、?抗體包被 → 4℃過夜
?div id="m50uktp" class="box-center"> 、?加入待檢抗原及一定量的酶標抗原(對照孔僅加酶標抗原)→ 37℃ 60分鐘
?div id="m50uktp" class="box-center"> 、?加底物液 → 37℃ 20分鐘
④ 用ELISA檢測儀測定OD值
被結(jié)合的酶標抗原的量由酶催化底物反應產(chǎn)生有色產(chǎn)物的量來確定
5
、阻斷ELISA本法主要用于檢測型特異性抗體。該方法現(xiàn)已成為豬傳染性胃腸炎(TGE)
、豬偽狂犬病(PR)及豬胸膜肺炎(AP)的主要檢測方法。下面以AP2型抗體的阻斷ELISA檢測法為例介紹其操作程序：
① 100μl AP2型工作量抗原包被 → 4℃過夜
，洗滌三次、拋干② 用200μl阻斷緩沖液進行封閉 → 37℃ 60分鐘
，洗滌三次、拋干③ 加工作量1:4稀釋被檢豬血清100μl → 37℃ 60分鐘
，洗滌三次、拋干?div id="4qifd00" class="flower right">
?div id="4qifd00" class="flower right">
?div id="4qifd00" class="flower right">
?div id="4qifd00" class="flower right">
本試驗同時設(shè)標準陰、陽性血清對照
Elisa試劑盒 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命
，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業(yè)精神作為標準，以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務來維護和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創(chuàng)美好的未來。技術(shù)支持：化工儀器網(wǎng) 管理登陸 網(wǎng)站地圖
