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產(chǎn)品快訊:過氧化物酶(POD)活性檢測試劑盒
規(guī)格:50T/48S
注意:正式測定之前選擇2-3 個預期差異大的樣本做預測定
。產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體 60mL×1 瓶
試劑一:液體 60mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 0.33mL×2 瓶,4℃保存;用時每瓶加入5mL 試劑一;用不完的試劑4℃保存一周;
試劑三:液體 10 mL×1 瓶
,4℃保存。產(chǎn)品說明:
POD(EC 1.11.1.7)廣泛存在于動物
、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,可催化過氧化氫氧化酚類和胺類化合物,具有消除過氧化氫和酚類、胺類毒性的雙重作用。POD 催化 H2O2 氧化特定底物, 在470nm有特征光吸收。需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機
、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水過氧化物酶(POD)活性檢測試劑盒操作步驟:
一
1
細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量(104 個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL 提取液)
組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入
1mL 提取液)
2、 血清(漿)樣品:直接檢測。二
1
2、測定前將試劑一
3、樣本測定表
試劑名稱(µL)測定管
樣本15
蒸餾水270
試劑一520
試劑二130
試劑三135
在1mL玻璃比色皿中按順序加入上述試劑
A1和1min30s后的吸光值A2。計算ΔA=A2-A1
注意:
a.若一次性測定樣本較多
b.如果ΔA 小于0.005
三
1、 血清(漿)POD 活性
單位定義:每mL血清(漿)在每mL 反應體系中每分鐘A470 變化0.01 為一個酶活力單位
2
(1)按樣本蛋白濃度計算
單位定義:每mg組織蛋白在每mL反應體系中每分鐘A470變化0.01為一個酶活力單位
POD(U/mg prot)=ΔA×V反總÷(V樣×Cpr)÷0.01÷T =7133×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算
單位定義:每g組織在每mL反應體系中每分鐘A470變化0.01為一個酶活力單位
POD(U/g鮮重)=ΔA×V反總÷(W×V樣÷V樣總)÷0.01÷T =7133×ΔA÷W
(3)按細菌或細胞數(shù)量計算
單位定義:每1萬個細菌或細胞在每mL反應體系中每分鐘 A470 變化0.01為一個酶活力單位。
POD(U/104 cell)=ΔA×V反總÷(500×V樣÷V 樣總)÷0.01÷T=14.27×ΔA
V反總:反應體系總體積
過氧化物酶試劑盒本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命
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