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干貨分享:細(xì)胞培養(yǎng)板的選擇與常見問題解答
細(xì)胞培養(yǎng)板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型);培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6
、12、24、48、96、384、1536 孔等;具體選擇時(shí)根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的類型(1)平底和圓底(U型和V型)培養(yǎng)板的區(qū)別和選擇:
貼壁細(xì)胞一般用平底培養(yǎng)板
不同型狀的板子自然有不同用途。平底的什么類型的細(xì)胞都可用
,但當(dāng)細(xì)胞數(shù)目較少,如做克隆時(shí),就用96孔平底板,另外,做MTT等實(shí)驗(yàn)時(shí),無論貼壁和懸浮細(xì)胞,一般均用平底板。至于U或V型板,一般在某些特殊要求時(shí)才使用
。如在免疫學(xué)方面,當(dāng)做兩種不同淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng)時(shí),需要二者相互接觸以刺激,因此,一般需要U型板,因細(xì)胞會(huì)由于重力的作用而聚集在一個(gè)很小的范圍內(nèi)。V型板的用途更少
,一般用于細(xì)胞殺傷實(shí)驗(yàn)時(shí),為了使效靶細(xì)胞緊密接觸,常使用V型板,但這種試驗(yàn)也可用U型板替代(加入細(xì)胞后,低速離心)如果是養(yǎng)細(xì)胞的話,通常是選用平底的。圓底的好像沒聽說過拿來養(yǎng)細(xì)胞。圓底的通常是拿來做分析
, 化學(xué)反應(yīng), 或是保存樣品用的, 因?yàn)閳A底比較好將液體吸得干凈,如果用平底的就不好吸了(2)細(xì)胞培養(yǎng)常見問題與解答
問:我看到培養(yǎng)板有4
答:要根據(jù)你具體的實(shí)驗(yàn)要求
問:我想測(cè)吸光度用酶標(biāo)儀,用多孔細(xì)胞培養(yǎng)板行嗎?請(qǐng)問酶標(biāo)板多孔細(xì)胞培養(yǎng)板有什么區(qū)別?
答:用多空細(xì)胞培養(yǎng)板測(cè)吸光度肯定可以拉
區(qū)別:酶標(biāo)板一般要比細(xì)胞培養(yǎng)板貴,細(xì)胞板主要做細(xì)胞培養(yǎng)
(3)細(xì)胞培養(yǎng)板的密閉和污染問題
細(xì)胞培養(yǎng)板的加樣和操作:細(xì)胞培養(yǎng)板在進(jìn)行細(xì)胞操作時(shí)同樣遵循嚴(yán)格無菌的原則,各項(xiàng)操作要保證規(guī)范
問:96
答:
1. 蓋子很松,屬于半開放培養(yǎng)
,這樣的目的是透氣(實(shí)際上是為了使培養(yǎng)皿外的co2能夠與培養(yǎng)皿充分交換,維持培養(yǎng)基的pH值)。2. 凡事有利必有弊
a 培養(yǎng)箱內(nèi)空氣必須清潔(定期紫外線照
b 培養(yǎng)箱內(nèi)的濕度必須始終保持為100%(培養(yǎng)箱內(nèi)放置無菌蒸餾水的水槽)。
就好像培養(yǎng)皿
問:我使用24孔板
答:在超凈臺(tái)內(nèi)如果操作規(guī)范的話應(yīng)該可以的,我想你可以充分利用培養(yǎng)版的蓋子
(4)細(xì)胞分布不均及解決辦法
問:我的細(xì)胞接種培養(yǎng)板
答:請(qǐng)問你的細(xì)胞是如何混勻的?是滴管吹打還是振蕩培養(yǎng)板?如果是后者
(5)6孔板接種和換液?jiǎn)栴}:
問:我的細(xì)胞傳代很正常,但一種到六孔板里(不管加藥和對(duì)照)
答:可能跟你加液的溫度有關(guān)
(6)24孔板接種問題:
問:把細(xì)胞消化接種到24孔板之后,已經(jīng)四天了
答:1. 我想你的培養(yǎng)液可能加的太少了
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