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實(shí)驗(yàn)干貨—ELISA實(shí)驗(yàn)顯性淡
Elisa 實(shí)驗(yàn)以靈敏度較高
一、顯色淡，靈敏度偏低
可能原因及解決方法：
試劑盒從2~8℃冰箱取出后打開(kāi)盒蓋
，于室溫平試劑盒未充分平衡衡至少20分鐘，確保所有試劑已平衡至室溫(約25℃)樣品一般選擇培養(yǎng)上清、血清、血漿。其他樣品2
、樣品不適合做ELISA檢測(cè)形式可能不適合做ELISA檢測(cè)或者需要優(yōu)化檢測(cè)的條件(例如稀釋液的成分)3、酶標(biāo)板在貯存或洗后拍干時(shí)過(guò)分防止板過(guò)于干燥
，干燥4、包被抗體遭到破壞 操作溫和
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9、品出現(xiàn)深藍(lán)色;S4-5有淡藍(lán)色;機(jī)器判定620n為因素影響
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、酶標(biāo)板不適合做ELISA附力板子二、出現(xiàn)白板，陽(yáng)性對(duì)照不顯色
可能原因及解決方法：
1
、顯色液變質(zhì)更換新的顯色液2、洗滌液配制有誤請(qǐng)按說(shuō)明書(shū)所示稀釋倍數(shù)配制
3
、未加酶結(jié)合物而認(rèn)為已加入注意不要漏加4
、終止液誤作洗滌液稀釋或當(dāng)?shù)孜镆菏褂妹看渭右呵熬鶓?yīng)看清標(biāo)簽請(qǐng)按照說(shuō)明書(shū)所示配置說(shuō)明書(shū)，注意5
、標(biāo)準(zhǔn)品稀釋方法錯(cuò)誤/或標(biāo)準(zhǔn)品有問(wèn)題單位和稀釋倍數(shù)，建議使用同批次試劑盒，不能混用不6
、不同試劑盒或不同批號(hào)的試劑混用，同試劑盒或不同批號(hào)的試劑三、不正常的標(biāo)準(zhǔn)曲線
可能原因及解決方法：
1
、錯(cuò)誤的方法重懸標(biāo)準(zhǔn)品加入正確量的溶液重懸標(biāo)準(zhǔn)品，重懸充分2
、標(biāo)準(zhǔn)品稀釋錯(cuò)誤按照說(shuō)明書(shū)要求稀釋標(biāo)準(zhǔn)品3
、標(biāo)準(zhǔn)品污染用一次性的滅菌吸頭，標(biāo)準(zhǔn)品貯存于2-8℃4
、錯(cuò)誤的倍比稀釋步驟按照說(shuō)明書(shū)倍比稀釋標(biāo)準(zhǔn)品TMB為底物和以O(shè)PD為底物的試劑盒均有使用，5、波長(zhǎng)選擇錯(cuò)誤而前者比色波長(zhǎng)為450nm
，后者為492nm。雙波長(zhǎng)比色分析優(yōu)于單波長(zhǎng)6
、標(biāo)準(zhǔn)品混用不同批號(hào)試劑勿混用7
、試劑盒在運(yùn)輸途中時(shí)間太盡量縮短運(yùn)輸時(shí)間，夏季應(yīng)放冰塊降溫長(zhǎng)，溫度太高，標(biāo)準(zhǔn)品失ELISA未終止而直接檢測(cè)4顯色需終止后檢測(cè)8
、50nm和620nm數(shù)高的現(xiàn)象。四、OD值超出正常范圍
可能原因及解決方法：
1、錯(cuò)誤的樣品或標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋按照說(shuō)明書(shū)稀釋
2
、偶聯(lián)抗體濃度過(guò)高按照說(shuō)明書(shū)調(diào)整到最佳的濃度3
、TMB底物孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)調(diào)整到合適的孵育時(shí)間4
、樣品或標(biāo)準(zhǔn)品污染避免污染5
、錯(cuò)誤的孵育時(shí)間或溫度按照說(shuō)明書(shū)6、孵育時(shí)未加蓋導(dǎo)致溶液揮發(fā)和污染 貼封片或加蓋
elisa試劑盒本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命
，追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作，共創(chuàng)美好的未來(lái)。技術(shù)支持：化工儀器網(wǎng) 管理登陸 網(wǎng)站地圖
