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本生帶您了解：ELISA實驗中常見問題和注意事項
用于ELISA測定的臨床標本最為常用的是血清(漿)
1)要注意避免出現(xiàn)嚴重溶血及血清中混有紅細胞
2)標本凝固不全強行離心
3)血清標本可在2～8℃下保存1周
ELISA測定中試劑準備：
在實驗開始前
加血清樣本及反應(yīng)試劑：
血清樣本使用微量加樣槍加樣
1)加樣太快，無法保證微量加樣的準確性和均一性。需勻速加樣
2)加樣應(yīng)直接加入反應(yīng)孔底部
3)反應(yīng)試劑的加入時先要注意試劑的有效期
溫育的時間與溫度：
溫育是ELISA測定中最容易出現(xiàn)問題的步驟。溫育溫度應(yīng)在37℃
1)要保證在設(shè)定的溫度下有足夠的反應(yīng)時間
2)因為采用水浴
ELISA測定的洗板：
全自動洗板機的使用應(yīng)注意以下幾點：
1)洗板前
，應(yīng)檢查洗液瓶、蒸餾水瓶是否充足，廢液瓶是否滿瓶2)在自檢過程中注意觀察洗液灌注是否通暢
，排液是否通暢。3)在洗板過程中，應(yīng)注意觀察反應(yīng)孔每孔是否灌滿且無外溢
，每孔吸水是否吸盡，并且要保證洗液在孔中放置的時間。BUNSEN本生提醒：ELISA測定以TMB為底物的顯色
加入底物開始顯色反應(yīng)前
，最好是先檢查一下底物溶液的有效期。滴入A、B顯色劑后ELISA的比色測定
ELISA的比色測定由酶標儀進行測定
ELISA測定結(jié)果判定
結(jié)果判定一般是根據(jù)比色結(jié)果和肉眼觀察綜合判定
對ELISA測定中出現(xiàn)問題的可能原因(非試劑盒本身的原因)
1)弱陽性質(zhì)控樣本檢測不出溫育的時間或溫度不夠;顯色反應(yīng)時間太短;所用配制緩沖液的蒸餾水有問題
2)測定的重復性差，這是由于測定操作引起的問題
①加樣本及試劑量不準;孔間不一致
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③加錯樣本
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⑤不同批號試劑盒中組分混用
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血清標本未凝固即加入
，反應(yīng)孔內(nèi)出現(xiàn)纖維蛋白凝固或殘留血細胞，易出現(xiàn)假陽性等。3)全部孔都不顯色
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③漏加顯色劑A或B
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4)全部板孔均有顯色
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②顯色液變質(zhì)
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ELISA試劑盒 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命
，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業(yè)精神作為標準，以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創(chuàng)美好的未來。下一篇：如何清洗移液管
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