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影響酶促反應(yīng)的因素:溫度、PH及抑制劑作用
酶作為生物催化劑與一般催化劑一樣呈現(xiàn)溫度效應(yīng)。酶促反應(yīng)開始時，反應(yīng)速度隨溫度升高增快
酶的最適溫度不是一個常數(shù)，與作用時間長短有關(guān)
酶的催化活性與環(huán)境PH有密切關(guān)系
酶的最適PH不是一個特征物理常數(shù)
在酶促反應(yīng)過程中
實(shí)例如下：
一、試劑
5%三氯醋酸溶液
。1mmol/L苯甲脒;稱取19.25g苯甲脒，用少量水溶解，定容至100ml。1%酪蛋白溶液;取1g酪蛋白
，加0.1mol/L氫氧化鈉溶液10ml、水40ml，置60℃水浴加入至溶解，放置室溫后，加水稀釋成100ml，并調(diào)至PH8.0.0.1mol/L硼酸緩沖液;
A液
，0.1mol/L硼酸(H2BO3);稱取6.18gH3BO3溶于1000mL水中。B液
，0.025mol/L硼砂(Na2B4O7·10H2O);稱取9.54g硼砂(Na2B4O7·10H2O)溶液1000ml水中
。PH7.4硼酸緩沖液;90ml A液+10ml B液
PH8.0硼酸緩沖液;70ml A液+30ml B液
PH9.0硼酸緩沖液;20ml A液+80ml B液、
材料
酪蛋白酶溶液：50-200ug/ml
，用0.1mol/L,PH8.0硼酸緩沖液配制?div id="4qifd00" class="flower right">儀器：
試管1.5cm x15cm(x19);移液管1ml(x7)
，2mL(x3)，5mL(x5);量筒100mL(x1)，恒溫水浴(0℃);白瓷板;膠頭滴管操作方法;
溫度對酶活力的影響
取3只試管，按下表操作;
空白管;現(xiàn)在試管中加入1.0mL 1%酪蛋白溶液和3.0mL 5%三率醋酸溶液
將樣品管和空白管分別離心，3000r/min
，5分鐘，取上清液于280nm處測定各管的吸光值，并比較之。Ph對酶活力的影響
取3支試管按下表操作;
空白管;現(xiàn)在試管中加入1.0ml1%酪蛋白溶液和3.0ml5%三氯醋酸溶液
，搖勻后，在加入0.2ml酶液，0.8ml蒸餾水，在37℃保溫10min。將樣品管和空白管分別離心
，3000r/min，5分鐘，取上清液于280nm處測定各管的吸光值，并比較值。抑制劑對酶活力的影響
取3之試管，按下表操作;
空白管;現(xiàn)在試管中加入1.0mL1%酪蛋白溶液和3.0mL5%三氯酸溶液
，搖勻后，再加入0.2mL酶液，0.8mL蒸餾水，在37℃保溫10min。將樣品管和空白管分別離心，3000r/min
，5分鐘，取上清液于280nm處測定各管的吸光值，并比較之。注意事項(xiàng);
1
、由于胰蛋白酶活力不同，因此實(shí)驗(yàn)應(yīng)隨時檢查反應(yīng)進(jìn)行情況。如反應(yīng)進(jìn)行的太快，應(yīng)適當(dāng)稀釋酶液;則應(yīng)減少酶溶液的稀釋倍數(shù)。2
、注意不要在檢查反應(yīng)程度時使各管溶液混雜。試劑盒 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升
。公司在經(jīng)營中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待技術(shù)支持：化工儀器網(wǎng) 管理登陸 網(wǎng)站地圖
