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BUNSEN本生分享：熒光定量PCR耗材的選擇
PCR是分子生物學(xué)研究的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)
第一步
，選擇通量根據(jù)樣品數(shù)量選擇通量，PCR耗材的最常見規(guī)格為：
管：0.5 mL, 0.2 mL, 0.1 mL
96 孔板：0.2 mL, 0.1 mL
384 孔板：0.02 mL
單管
8聯(lián)管
96孔板
384孔板
第二步
， 選擇加樣體積：不同類型管，可供選擇的容量體積不同。單管: 0.5 mL, 0.2 mL(標(biāo)準(zhǔn)), 0.1 mL(低容
，或稱快速)8聯(lián)管： 0.2 mL(標(biāo)準(zhǔn)), 0.1 mL(低容，或稱快速)
96 孔板：0.2 mL(標(biāo)準(zhǔn)), 0.1 mL(低容
，或稱快速)384 孔板：0.02 mL
“(低容)"意味著高度更低
。 低容耗材更短的設(shè)計(jì)程度減少了反應(yīng)體系上方的空間，降低了蒸發(fā)的影響并提高了熱傳導(dǎo)效率，因此也被稱為“快速"管或板。第三步， 對于PCR板的選擇
，需要進(jìn)一步根據(jù)實(shí)驗(yàn)類型和儀器選擇裙邊、切割角、顏色等。3.1裙邊： 根據(jù)儀器加熱模塊類型選擇
無裙邊:
兼容絕大多數(shù)PCR儀和實(shí)時(shí)PCR儀的模塊
，易于剪裁，但不適用于自動(dòng)化應(yīng)用。半裙邊：
板的邊緣周圍具有短的邊緣，加熱或移液過程中提供足夠的支撐
，不宜變形彎曲全裙邊：
有覆蓋板高度的邊緣
，適用于自動(dòng)化操作3.2顏色： 透明或白色
PCR板通常提供透明、磨砂或白色不同的顏色形式
，以適用于不同類型PCR反應(yīng)。在實(shí)時(shí)PCR的反應(yīng)時(shí)，與透明耗材相比，我們更推薦使用白色塑料耗材，以實(shí)現(xiàn)靈敏和準(zhǔn)確的熒光檢測。白色耗材通過阻止熒光折射出管來提高qPCR數(shù)據(jù)的靈敏度和一致性
。折射被最小化時(shí)，更多的信號被反射回檢測器，從而增加信噪比(圖B)3.4 切角
切角是對PCR板的一個(gè)角缺失
，取決于所需要適配的儀器。切角可能位于96孔板的H1，H12或A12位置，或384孔板的A24位置3.5品牌選擇
市場上有許多品牌和廠家提供PCR耗材
，選擇時(shí)需要考慮哪些因素呢? PCR耗材品質(zhì)由包括原料、無污染、一致性等決定。1. 原料：Thermo Scientific選用優(yōu)質(zhì)的全新醫(yī)用級聚丙烯原料
2. 生產(chǎn)環(huán)節(jié)：十萬級潔凈車間生產(chǎn)
，無RNase、DNase和外源DNA污染3. 批間一致性：遵循嚴(yán)格的生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)和檢測標(biāo)準(zhǔn)，由資深專家使用的設(shè)備進(jìn)行生產(chǎn)
，確保批間一致性和可追溯性
，確保用戶獲得可靠PCR實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。第四步
，選擇正確的PCR膜PCR板選好后，還需要選擇一張好的PCR膜來密封
，才能保證獲得準(zhǔn)確可靠的PCR數(shù)據(jù)，這對實(shí)時(shí)PCR尤其重要!我們的Thermo Scientific™ Absolute™ qPCR粘性封口膜(貨號AB1170)產(chǎn)品采用壓力敏感密封設(shè)計(jì)。只有在施加壓力的情況下
，這種非粘性粘合產(chǎn)品才可以粘合到孔的邊緣上。其只在需要粘合的位置產(chǎn)生良好的密封效果，使孔開口位置變得超透明，實(shí)現(xiàn)的熒光信號傳輸強(qiáng)效壓敏粘附
其光學(xué)透明度可用于qPCR及其他熒光應(yīng)用
一致的封口厚度和透明度，確保整塊板信號傳輸相等
可剝離
膜兩端無粘性，輕松進(jìn)行密封和去除操作
適用溫度范圍：–80°C至110°C
PCR耗材 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命
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