。經(jīng)過洗滌后,加入底物TMB顯色
,以測定樣品中IFI44的含量
。
二、實驗準(zhǔn)備
1. 請確保實驗環(huán)境清潔
,避免污染
。
2. 將試劑盒及所需試劑置于室溫下平衡30分鐘。
3. 準(zhǔn)備實驗所需的加樣器
、移液管
、試管等器材,并確保其清潔干燥
。
三
、操作步驟
1. 加樣:按照實驗設(shè)計,分別設(shè)置空白孔
、標(biāo)準(zhǔn)孔和待測樣品孔
。在酶標(biāo)包被板上準(zhǔn)確加樣50μl標(biāo)準(zhǔn)品,待測樣品孔中先加入40μl樣品稀釋液
,再加入10μl待測樣品(樣品最終稀釋度為5倍)
。加樣時請注意,樣品應(yīng)加于酶標(biāo)板孔底部
,盡量不觸及孔壁
,輕輕晃動混勻。
2. 溫育:用封板膜封板后
,將酶標(biāo)板置于37℃恒溫箱中溫育30分鐘
。
3. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水稀釋20倍,備用
。
4. 洗滌:小心揭掉封板膜
,棄去液體,甩干。每孔加滿洗滌液
,靜置30秒后棄去
,如此重復(fù)5次,拍干
。
5. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl
,空白孔除外。
6. 再次溫育:同步驟2
。
7. 再次洗滌:同步驟4
。
8. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl
,輕輕震蕩混勻
,置37℃避光顯色15分鐘。
9. 終止:每孔加終止液50μl
,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)
。
10. 測定:在加終止液后15分鐘以內(nèi),使用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定各孔的光密度(OD值)
。
本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命
,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀守法
,嚴于律己
,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)
,以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護和拓展市場
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