,單面接觸是為了防止氣泡的形成
,不能有氣泡。這對(duì)實(shí)驗(yàn)觀察有影響
。
對(duì)于液體樣品
,蓋玻片可防止被觀察的液體接觸物鏡并允許液體分散。
創(chuàng)建臨時(shí)安裝幻燈片時(shí)蓋住蓋玻片非常重要
。否則
,很容易形成氣泡
,并且很難觀察到疊加在細(xì)胞上的氣泡
。
正確的操作是:將蓋玻片的一側(cè)與載玻片上的一滴水接觸,利用水的表面張力慢慢降低蓋玻片
,讓水充滿載玻片和蓋玻片之間的空間而不留下任何痕跡
。它。是否有氣泡?
所以答案是:用鑷子夾住蓋玻片的一側(cè)
,先將另一側(cè)接觸水滴
,然后輕輕放平,蓋在待觀察的材料上
。


以下天津本生技術(shù)避免載玻片和蓋玻片之間形成氣泡的專業(yè)方法及操作要點(diǎn):
一
、關(guān)鍵操作步驟
傾斜蓋片法?
用鑷子夾住蓋玻片一側(cè)邊緣,使其與載玻片呈30°-45°角
,先讓一側(cè)邊緣接觸液滴邊緣,再緩慢放下另一側(cè)
通過水的表面張力使液體均勻擴(kuò)散
,自然排出空氣
液體量控制?
滴加液體量以10-20μL為宜
,確保蓋玻片覆蓋后液體恰好鋪滿間隙而無溢出
過多液體會(huì)導(dǎo)致蓋玻片漂浮,過少則無法填充間隙
二
、特殊技巧與注意事項(xiàng)
氣泡排除方法?
若已產(chǎn)生氣泡
,可在蓋玻片一側(cè)滴加緩沖液,另一側(cè)用吸水紙引流將氣泡驅(qū)出
輕微按壓蓋玻片邊緣(僅限非脆弱樣本)幫助氣泡移動(dòng)
材料預(yù)處理?
蓋玻片使用前需用無水乙醇清潔并干燥
,避免灰塵干擾
活細(xì)胞觀察建議將封片劑恢復(fù)至室溫,減少溫差導(dǎo)致的氣泡
顯微鏡適配要求?
高倍鏡觀察需選擇厚度≤0.17mm的標(biāo)準(zhǔn)蓋玻片
,過厚會(huì)引入光學(xué)誤差
三
、常見錯(cuò)誤與修正
錯(cuò)誤操作? ?修正方案?
垂直快速蓋下蓋玻片 改為傾斜緩慢蓋片
液體過量導(dǎo)致溢出 用移液器精準(zhǔn)控制加液量
使用過期/變形的蓋玻片 選擇無劃痕、透光均勻的新蓋玻片
注:對(duì)于免疫組化等特殊實(shí)驗(yàn)
,建議使用防脫載玻片并避免過度清洗涂層
。
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