,檢查試劑保存條件(避光、防潮)
。
操作失誤?
未按說(shuō)明書(shū)步驟操作(如漏加關(guān)鍵組分)
。
解決?:嚴(yán)格遵循操作流程,新手建議使用帶染料的試劑盒輔助驗(yàn)證
。
三
、標(biāo)曲顯色正常,樣本不顯色
樣本濃度過(guò)低?
目標(biāo)蛋白濃度低于檢測(cè)限
,或樣本類(lèi)型(如血漿
、細(xì)胞上清)不匹配。
解決?:嘗試高敏ELISA試劑盒或濃縮樣本
。
樣本干擾物質(zhì)?
溶血
、細(xì)菌污染、類(lèi)風(fēng)濕因子等導(dǎo)致假陰性
。
解決?:離心去除雜質(zhì)
,添加蛋白酶抑制劑或稀釋樣本。
四
、顯色過(guò)強(qiáng)或無(wú)梯度
洗滌不凈
殘留HRP酶催化底物過(guò)度顯色
,尤其是TMB前最后一次洗滌。
解決?:確保洗液注滿(mǎn)孔
,拍干液體
,手動(dòng)洗板時(shí)更換吸水紙。
底物孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)?
TMB顯色超過(guò)15分鐘可能導(dǎo)致OD值飽和
。
解決?:顯色10-15分鐘后及時(shí)終止(最高濃度孔出現(xiàn)深藍(lán)色即可)
。
五、其他注意事項(xiàng)
移液精度?:定期校準(zhǔn)
移液器,避免加樣誤差
。
環(huán)境控制?:避免底物(TMB)提前氧化(如避光保存)
。
對(duì)照設(shè)置?:陰陽(yáng)性對(duì)照可幫助區(qū)分系統(tǒng)誤差與樣本問(wèn)題。
通過(guò)規(guī)范操作和針對(duì)性排查
,可顯著改善顯色異常問(wèn)題
。
注:以上資料僅供參考,不作為實(shí)驗(yàn)依據(jù)
,具體請(qǐng)咨詢(xún)技術(shù)老師或產(chǎn)品品牌供應(yīng)商
。
天津本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升
。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法
,嚴(yán)于律己,寬仁以待
,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)
,以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿(mǎn)足客戶(hù)的需求
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