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酶標(biāo)板實(shí)驗(yàn)優(yōu)化：加樣
、洗滌、讀板全流程技巧以下是天津本生對(duì)酶標(biāo)板實(shí)驗(yàn)全流程優(yōu)化的關(guān)鍵技巧
，涵蓋加樣、洗滌和讀板三大核心環(huán)節(jié)：一、加樣優(yōu)化技巧
精準(zhǔn)加樣控制?
使用多道移液器(誤差<2%)
，單次加樣時(shí)間控制在10分鐘內(nèi)，避免預(yù)孵育時(shí)間差異影響重復(fù)性高濃度樣本需預(yù)稀釋(如1:20 PBS稀釋)，溶血樣本應(yīng)棄用
防蒸發(fā)處理?
孵育時(shí)反應(yīng)板需加蓋密封膜
，并置于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)保持濕度液體樣本4℃保存≤1周
，-80℃長(zhǎng)期保存需密封防凍干
二、洗滌關(guān)鍵參數(shù)
操作要點(diǎn) 優(yōu)化方案 注意事項(xiàng)
洗滌液配制 Tween-20濃度0.05%-0.1%
洗滌次數(shù) 常規(guī)3-5次
拍干方式 倒置拍板力度均勻，使用無屑濾紙 垂直猛拍易導(dǎo)致包被物脫落
三
顯色控制?
底物加入后每10分鐘觀察顯色
雙波長(zhǎng)檢測(cè)(主450nm/參比630nm)可減少孔間干擾
儀器校準(zhǔn)?
讀板前預(yù)熱酶標(biāo)儀，設(shè)置溫控參數(shù)(如37℃±0.5℃)
邊緣孔數(shù)據(jù)棄用
四
高脂血樣本?：12000rpm離心10分鐘去除脂蛋白
組織勻漿?：添加RIPA裂解液后-80℃保存，避免反復(fù)凍融
流程銜接提示?：
洗滌后需立即進(jìn)行下一步操作
自動(dòng)化洗板機(jī)需定期校準(zhǔn)吸液高度(距孔底0.5-1mm)
注：以上資料僅供參考
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