elisa實驗中洗板的目的是什么
以下是ELISA實驗中洗板操作的關(guān)鍵注意事項,綜合多來源信息整理:
一
、洗滌液處理
新鮮配制?
洗滌液需現(xiàn)配現(xiàn)用
,避免絮狀物堵塞洗板機噴頭或造成花板現(xiàn)象。
推薦使用去離子水/蒸餾水稀釋濃縮液
,吐溫20濃度控制在0.05%-0.2%(過高會解
吸附抗體)
。
溫度控制?
冬季需保持洗液溫度20-30℃,低溫易導(dǎo)致洗滌不凈
。
二、手工洗板要點
操作規(guī)范?
加液量以剛滿反應(yīng)孔為限(約200-300μL)
,避免孔間交叉污染
。
甩板時需垂直翻轉(zhuǎn)120-150度,迅速干脆
,禁止手腕搖擺旋轉(zhuǎn)
。
拍干技巧?
使用無碎屑濾紙(非衛(wèi)生紙),每次拍打更換區(qū)域
,最后一次需拍干。
力度適中:過輕殘留多
,過猛可能損壞板條
。

三、洗板機使用
參數(shù)設(shè)置?
洗滌量350μL/孔
,浸泡30-60秒
,洗板4-5次(根據(jù)說明書調(diào)整)。
需檢查噴頭通暢性
,殘留量應(yīng)≤1μL/孔。
補充處理?
機洗后建議人工補洗1-2次
,減少液體殘留
。
四、通用注意事項
防止污染?
高濃度樣本孔與空白孔需間隔布局
,甩液時優(yōu)先處理低濃度孔
。
洗板前兩遍需特別注意防溢
。
時間控制?
每步洗滌靜置1-2分鐘,總洗滌時間不足會導(dǎo)致背景偏高
。
板面維護?
保持
酶標(biāo)板濕潤
,避免孔內(nèi)干涸導(dǎo)致酶失活
。
五
、錯誤操作警示
禁止?:減少洗滌次數(shù)、縮短浸泡時間
、重復(fù)使用吸水紙
、混用不同品牌洗液。
避免?:洗板后長時間暴露空氣(顯色OD值會衰減)
。
通過規(guī)范操作可顯著降低背景干擾,提高數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性
。若出現(xiàn)花板現(xiàn)象,建議檢查洗液新鮮度及溫度
。
注:以上資料僅供參考
,完整操作請以實說明為準(zhǔn),不同品牌可能存在細(xì)節(jié)差異?
。
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