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以下是關(guān)于人血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說明綜合指南:
BS-10001 人血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)ELISA試劑盒
一
采用雙抗體夾心法,通過預(yù)包被在酶標(biāo)板上的抗VEGF抗體捕獲樣本中的VEGF
,再與HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體形成復(fù)合物,經(jīng)TMB顯色后測(cè)定OD值,濃度與顏色深淺成正比。二
、試劑盒組成核心組分?:預(yù)包被酶標(biāo)板(96孔)
、標(biāo)準(zhǔn)品(40ng/瓶)、HRP標(biāo)記抗體、TMB底物、終止液輔助溶液?:20×濃縮洗滌液(需1:20稀釋)
、10×標(biāo)本稀釋液(需1:10稀釋)三、樣本處理
血清/血漿?:3000rpm離心10-30分鐘
,避免反復(fù)凍融細(xì)胞上清?:離心去除顆粒物
,分裝保存于-20℃組織勻漿?:生理鹽水搗碎后離心取上清
四、標(biāo)準(zhǔn)品配制
標(biāo)準(zhǔn)品用1ml蒸餾水復(fù)溶(40ng/ml)
梯度稀釋:依次進(jìn)行對(duì)倍稀釋(62.5-2000pg/mL)
五
加樣?:標(biāo)準(zhǔn)品/樣本各100μL
洗滌?:手工洗板需浸泡1-2分鐘,重復(fù)3-5次
顯色?:
加TMB底物90μL
終止反應(yīng)后立即測(cè)定450nm OD值
六、注意事項(xiàng)
保存條件?:試劑盒2-8℃保存
交叉污染?:使用一次性吸頭
質(zhì)量控制?:板內(nèi)變異系數(shù)<10%,板間<15%
七
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)
注:本試劑盒僅限科研使用
天津本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命
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