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以下是關(guān)于小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合指南:
BS-2016 小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA試劑盒
一
、試劑盒組成?預(yù)包被酶標(biāo)板?:96孔或48孔規(guī)格
標(biāo)準(zhǔn)品?:通常為80ng/瓶或240ng/L濃度
,提供2-5瓶檢測試劑?:
酶標(biāo)抗體工作液(HRP標(biāo)記)
顯色液(TMB A/B液)
終止液(硫酸溶液)
輔助溶液?:
10×標(biāo)本稀釋液
封板膜
、密封袋等耗材二
樣本類型?:血清
、血漿、細(xì)胞上清液或組織勻漿處理方法?:
血清/血漿?:1000-3000×g離心10-30分鐘,去除顆?div id="4qifd00" class="flower right">
細(xì)胞上清?:離心去除細(xì)胞碎片
組織勻漿?:生理鹽水勻漿后離心取上清
保存條件?:-20℃分裝凍存
,避免反復(fù)凍融三、實驗步驟?(雙抗體夾心法)
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?:用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液配制梯度濃度(如0-400 ng/L)
加樣?:
每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本
,37℃孵育1-2小時洗滌?:甩干孔內(nèi)液體
,加滿洗滌液靜置30秒,重復(fù)3-5次加酶標(biāo)抗體?:每孔加入100μL HRP標(biāo)記抗體
,37℃孵育30-60分鐘顯色?:加入TMB底物避光反應(yīng)15-30分鐘
終止與檢測?:
加終止液(50μL/孔)后立即測定450nm OD值
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣本濃度
四
、注意事項?溫度控制?:
試劑使用前需室溫平衡20分鐘,避免低溫影響靈敏度
顯色反應(yīng)需嚴(yán)格避光
操作規(guī)范?:
避免孔間交叉污染
,使用獨立槍頭邊緣孔易出現(xiàn)“邊緣效應(yīng)"
,建議棄用外周孔數(shù)據(jù)有效性?:
標(biāo)準(zhǔn)曲線R2應(yīng)≥0.99,復(fù)孔CV值<15%
五
、常見問題?靈敏度下降?:可能因試劑未恢復(fù)至室溫或超過有效期
背景過高?:洗滌不或樣本溶血導(dǎo)致
如需完整說明書或技術(shù)支持
,建議聯(lián)系廠商獲取最新版本。天津本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命
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