，需用稀釋液重構(gòu))

　　酶標(biāo)抗體、顯色劑(A/B液)

、終止液

　　濃縮洗滌液(需稀釋使用)

　　保存條件?

　　未開封試劑需2-8℃保存

，標(biāo)準(zhǔn)品及樣本稀釋后建議分裝凍存(-20℃以下)，避免反復(fù)凍融。

　　三、樣本處理

　　血清/血漿?：離心去除雜質(zhì)(1000×g

，15-20分鐘)，溶血樣本不可用。

　　組織勻漿?：需用PBS沖洗后勻漿

，離心取上清(5000×g，5-10分鐘)。

　　細(xì)胞培養(yǎng)上清?：直接離心(1000×g

，20分鐘)后檢測。

　　四、操作步驟

　　標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?：按說明書梯度稀釋(通常為2倍系列稀釋)

。

　　加樣與溫育?：

　　每孔加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本100μL

，37℃孵育1-2小時。

　　洗滌?：使用稀釋后的洗滌液洗板4-6次

。

　　顯色與終止?：

　　加入TMB顯色液

，避光反應(yīng)10-15分鐘，后加終止液。

　　檢測?：450nm波長讀取OD值

，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計算濃度。

　　五

、注意事項

　　避免試劑交叉污染

，不同批號組件勿混用。

　　顯色時間需嚴(yán)格控制，強(qiáng)陽性樣本可能需進(jìn)一步稀釋

。

　　實驗前需平衡所有試劑至室溫(約30分鐘)

。

　　如需具體參數(shù)(如標(biāo)準(zhǔn)品初始濃度、靈敏度等)