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兔子C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒實驗使用說明書
BS-4223 兔子C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒
以下是天津本生?兔子C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒?的標(biāo)準(zhǔn)化實驗操作說明：
一
采用?雙抗體夾心法?：
包被抗兔CRP抗體捕獲樣本中的CRP;
加入生物素化抗體形成復(fù)合物
，再結(jié)合HRP標(biāo)記鏈霉親和素;TMB顯色
二
組分 保存條件 規(guī)格與備注
預(yù)包被微孔板 4℃干燥 96孔(可拆卸)
CRP標(biāo)準(zhǔn)品 -20℃(凍干粉) 濃度梯度：39-5000 ng/mL
HRP標(biāo)記檢測抗體 4℃避光 含辣根過氧化物酶
TMB顯色液A/B 4℃避光 現(xiàn)配現(xiàn)用
終止液 室溫 顯色終止
20×濃縮洗滌液 室溫 使用前稀釋
三
血清/血漿?：
全血室溫靜置2小時或4℃過夜
避免溶血或反復(fù)凍融
組織勻漿?：
按重量比加入PBS勻漿
細(xì)胞培養(yǎng)上清?：直接離心去除沉淀
四、實驗步驟?
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?：
凍干標(biāo)準(zhǔn)品用稀釋液復(fù)溶
加樣與孵育?：
每孔加入50μL樣本或標(biāo)準(zhǔn)品，37℃孵育30分鐘;
洗滌5次(手動或自動洗板機(jī))
顯色與檢測?：
加入TMB顯色液(A/B各50μL)
加終止液50μL，立即450nm測OD值
五
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)、OD值為縱坐標(biāo)繪制曲線;
樣本濃度=曲線對應(yīng)值×稀釋倍數(shù)
。六
、注意事項?質(zhì)量控制?：
空白孔OD值應(yīng)<0.1，板內(nèi)變異系數(shù)<10%;
避免NaN3污染(抑制HRP活性)
。保存條件?：
未開封試劑盒2-8℃保存6個月
，開封后盡快使用。七、常見問題?
邊緣效應(yīng)?：溫育時使用水浴或預(yù)熱板/試劑至37℃以消除;
無信號?：檢查酶標(biāo)抗體活性及洗滌是否
。BS-4223兔子C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒 天津本生
注：以上資料僅供參考
天津本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命
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