以下是兔子白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合整理：

　　BS-4207  兔子白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒

　　一

、實驗原理

　　采用雙抗體夾心法：包被抗IL-1β抗體的微孔板捕獲樣本中的IL-1β，再與HRP標(biāo)記的檢測抗體結(jié)合形成復(fù)合物

，TMB顯色后通過OD值定量分析。

　　二、試劑盒組成

　　標(biāo)準(zhǔn)品?：通常為凍干粉(如2700ng/L)

，需用稀釋液復(fù)溶

　　酶標(biāo)試劑?：HRP標(biāo)記的檢測抗體(3ml/6ml)

　　洗滌緩沖液?：50×濃縮液

，需蒸餾水稀釋

　　底物(TMB)?和?終止液?各12ml

　　封板膜?、?密封袋?及說明書

　　三

、樣本處理要求

　　血清/血漿?：

　　避免溶血，離心條件：2000-3000rpm×10-30分鐘

　　短期保存于2-8℃

，長期需-20℃以下分裝，避免反復(fù)凍融

　　組織勻漿?：

　　按重量加入PBS勻漿

，離心取上清

　　細(xì)胞上清?：

　　離心去除碎片后分裝凍存

　　注意事項?：

　　避免使用含NaN3的樣本(抑制HRP活性)

　　四

、操作步驟

　　標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?：梯度稀釋至7個濃度，第8孔為空白對照

　　加樣?：

　　標(biāo)準(zhǔn)品/樣本各加50-100μl

，37℃孵育1-2小時

　　洗滌?：

　　使用稀釋后的洗滌液

，洗板4-6次，拍干

　　顯色?：

　　加TMB避光反應(yīng)15-30分鐘

，終止后15分鐘內(nèi)測OD450nm

　　五、注意事項

　　試劑使用前需平衡至室溫

，避免泡沫產(chǎn)生

　　不同批號試劑不可混用

，底物需避光保存

　　顯色后若OD值超出標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍，需稀釋樣本復(fù)測

　　六

、數(shù)據(jù)計算

　　以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)、OD值為縱坐標(biāo)繪制曲線

，通過回歸方程計算樣本濃度。

　　注：以上資料僅供參考，如需具體品牌試劑盒的完整說明書

，可參考對應(yīng)廠商提供的文檔。

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