以下是豬α半乳糖基抗原(α-Gal)ELISA試劑盒的實驗使用說明摘要：

　　BS-4661  豬α半乳糖基抗原(α-gal)ELISA試劑盒 天津本生

　　一

、實驗原理

　　采用雙抗體夾心法

，通過包被抗體捕獲樣本中的α-Gal抗原，再與酶標(biāo)抗體形成復(fù)合物，經(jīng)TMB顯色后測定OD值計算濃度。

　　二、試劑盒組成

　　預(yù)包被微孔板(48孔/96孔)

　　標(biāo)準(zhǔn)品(凍干粉，需用稀釋液重構(gòu))

　　酶標(biāo)試劑、顯色劑(A/B液)

、終止液

　　濃縮洗滌液(20-30倍)

　　三、樣本處理要求

　　樣本類型 處理方法

　　血清 室溫凝固后離心取上清(2000-3000轉(zhuǎn)/分

，20分鐘)

　　血漿 EDTA/肝素抗凝

，離心后取上清

　　組織勻漿 按1:9比例與PBS冰上研磨

　　保存條件 -20℃分裝，避免反復(fù)凍融

　　四

、操作步驟

　　平衡試劑?：所有組分室溫平衡15-30分鐘

　　標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?：按說明書梯度稀釋(如78-5000pg/mL)

　　加樣?：

　　標(biāo)準(zhǔn)品/樣本各50μL加入對應(yīng)孔

　　加入酶標(biāo)試劑50μL

，37℃孵育1-2小時

　　洗滌?：用1×洗滌液洗板3-5次，拍干

　　顯色?：加TMB避光反應(yīng)10-20分鐘

，終止后15分鐘內(nèi)檢測

　　五

、注意事項

　　避免孔板干燥或污染

　　顯色時間需嚴(yán)格控制

　　不同批號試劑不可混用

　　450nm波長讀取OD值

，建議做復(fù)孔

　　六

、性能參數(shù)

　　檢測范圍：125-4000pg/mL

　　批內(nèi)/批間CV：<10%

　　回收率：85%-115%

　　注：以上資料僅供參考，完整操作請以試劑盒內(nèi)附說明書為準(zhǔn)

。

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