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牛熱休克蛋白-70抗體(HSP-70-Ab)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書
以下是牛熱休克蛋白-70抗體(HSP-70-Ab)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說明摘要:
BS-3989 牛熱休克蛋白-70抗體(HSP-70-Ab)ELISA試劑盒
一
采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)
。通過包被抗體捕獲樣本中的HSP-70-Ab二
主要組分?:
預(yù)包被微孔板(96孔)
凍干標(biāo)準(zhǔn)品(通常含2瓶
樣品稀釋液(20mL)
HRP標(biāo)記檢測抗體(120μL
TMB顯色底物(A/B液分裝)
終止液(2N H2SO4)
自備物品?:
酶標(biāo)儀(450nm濾光片)
微量移液器及吸頭
37℃恒溫箱
三
血清/血漿?:3000rpm離心10-30分鐘,避免溶血或反復(fù)凍融
組織勻漿?:生理鹽水勻漿后離心取上清
保存?:分裝后-20℃凍存
四
試劑平衡?:所有組分室溫平衡15-30分鐘
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?:從10 ng/mL起始進(jìn)行倍比稀釋(建議7個梯度)。
加樣與孵育?:
每孔依次加入樣本/標(biāo)準(zhǔn)品(100μL)
洗滌?:使用稀釋后的洗滌液(1:25)洗板5次
顯色?:加入TMB底物
終止與檢測?:加終止液后30分鐘內(nèi)測450nm OD值
五
濃洗滌液結(jié)晶可37℃水浴溶解。
避免板條開封后受潮
,未用完需密封保存。不同批次試劑不可混用。
高濃度樣本需預(yù)稀釋(計(jì)算時乘以稀釋倍數(shù))
。六
、結(jié)果計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)、OD值為縱坐標(biāo)繪制曲線
,樣本濃度通過曲線方程計(jì)算。注:以上資料僅供參考,具體如需完整說明
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