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以下是兔子表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)室使用說明綜合指南:
BS-4200 兔子表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒 天津本生
一
采用雙抗體夾心法ELISA技術(shù),通過包被抗兔EGF抗體捕獲樣本中的目標(biāo)蛋白,依次加入HRP標(biāo)記檢測(cè)抗體和TMB底物顯色,顏色深度與EGF濃度呈正相關(guān)。
二
組分 96孔配置 48孔配置
預(yù)包被微孔板 1×96 1×48
標(biāo)準(zhǔn)品(凍干粉) 0.5ml×1 0.5ml×1
HRP標(biāo)記抗體 6ml 3ml
TMB顯色液 A/B液各6ml A/B液各3ml
20×洗滌緩沖液 25ml 15ml
終止液 6ml 3ml
三、樣本處理要求
血清/血漿?:采集后30分鐘內(nèi)2-8℃離心(1000×g,20分鐘),-20℃保存避免反復(fù)凍融
組織勻漿?:按1:9比例加入PBS勻漿
細(xì)胞上清?:1000×g離心20分鐘去除沉淀
四
加入1ml蒸餾水復(fù)溶凍干標(biāo)準(zhǔn)品,配成480pg/ml母液
倍比稀釋建立標(biāo)準(zhǔn)曲線(建議濃度梯度:480/240/120/60/30/0 pg/ml)
五
加樣?:標(biāo)準(zhǔn)品/樣本各加100μl
洗滌?:1×洗滌液洗板4-6次,每次浸泡1-2分鐘
加酶標(biāo)抗體?:100μl/孔
顯色?:加TMB避光反應(yīng)10-20分鐘
終止?:加終止液后30分鐘內(nèi)450nm測(cè)OD值
六
所有試劑使用前需平衡至室溫
避免溶血/脂血樣本影響結(jié)果
顯色液變藍(lán)即失效,不可使用
不同批次試劑不可混用
七
檢測(cè)范圍:15-480 pg/mL
靈敏度:<15 pg/mL
板內(nèi)/板間變異系數(shù):<10%
注:以上資料僅供參考
天津本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命
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