，避免反復(fù)凍融?。

　　四

、實驗操作步驟

　　1. 試劑準(zhǔn)備

　　標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?：按照說明書進行梯度稀釋(通常為1:2系列稀釋)

　　洗滌液配制?：將20×濃縮洗滌液用蒸餾水按1:20稀釋?

　　2. 加樣

　　設(shè)空白孔(不加樣品及酶標(biāo)試劑)

、標(biāo)準(zhǔn)孔和待測樣品孔

　　標(biāo)準(zhǔn)孔加入50μl標(biāo)準(zhǔn)品

　　待測樣品孔先加40μl樣品稀釋液，再加10μl待測樣品(終稀釋度5倍)

　　加樣時避免觸及孔壁

，輕輕混勻?

　　3. 孵育

　　封板后37℃溫育30分鐘?

　　溫育時建議將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)

，避免液體蒸發(fā)?

　　4. 洗滌

　　手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置1分鐘后甩盡

，重復(fù)5次

　　最后一次洗滌后在吸水紙上拍干

，避免殘留?

　　5. 加檢測抗體

　　每孔加入50μl生物素化檢測抗體工作液(空白孔除外)

　　37℃溫育30分鐘?

　　6. 加酶結(jié)合物

　　每孔加入50μl酶結(jié)合物工作液

　　37℃避光溫育30分鐘?

　　7. 顯色

　　每孔依次加入50μl顯色劑A和50μl顯色劑B

　　37℃避光顯色10分鐘(需定時觀察顏色變化)?

　　8. 終止反應(yīng)

　　每孔加入50μl終止液(顏色由藍變黃)

　　15分鐘內(nèi)完成OD值測定?

　　五、結(jié)果計算

　　以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)

，OD值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線

　　根據(jù)樣品OD值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出相應(yīng)濃度

　　若樣品經(jīng)過稀釋

，需乘以稀釋倍數(shù)得到實際濃度?

　　六

、注意事項

　　試劑保存?：未開封試劑盒2-8℃保存;使用前室溫平衡20分鐘;濃縮洗滌液結(jié)晶屬正常現(xiàn)象

，水浴加熱溶解后使用?

　　操作規(guī)范?：

　　使用一次性吸頭避免交叉污染

　　不同批次試劑勿混用

　　嚴(yán)格按說明書控制溫育時間和溫度?

　　安全防護?：

　　操作時佩戴手套和口罩

　　避免直接接觸終止液和顯色液

　　勿用嘴吸取任何試劑?

　　質(zhì)量控制?：

　　每次實驗應(yīng)包含標(biāo)準(zhǔn)曲線和質(zhì)控樣本

　　回收率應(yīng)在80-120%之間(血清樣本回收率通常為87-94%)?

　　結(jié)果解釋?：

　　本試劑盒僅供科研使用

，不用于臨床診斷

　　樣本值超出檢測范圍時需適當(dāng)稀釋后重測

　　注：以上資料僅供參考，具體產(chǎn)品請咨詢技術(shù)老師或是品牌供應(yīng)商

。

　　天津本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命

，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作