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以下是關(guān)于人I型前膠原氨基端肽(PINP)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說明,綜合整理自多個(gè)廠商的標(biāo)準(zhǔn)化操作流程和注意事項(xiàng):
BS-1688人I型前膠原氨基端肽(PINP)ELISA試劑盒
一
、檢測原理采用雙抗體夾心法或競爭法ELISA技術(shù),通過包被抗體捕獲樣本中的PINP抗原
二、試劑盒組成
預(yù)包被微孔板?:96孔或48孔規(guī)格
標(biāo)準(zhǔn)品?:凍干粉或液體
檢測抗體?:HRP標(biāo)記或生物素化抗體?
底物系統(tǒng)?:TMB溶液(A/B組分)及終止液?
洗滌緩沖液?:20×或30×濃縮液,需稀釋使用?
三
血清/血漿?:
采集后室溫靜置30分鐘
避免溶血或脂血
組織勻漿?:
按1:9比例加入PBS勻漿
四、操作步驟
試劑準(zhǔn)備?:
標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶后梯度稀釋(如0-32ng/mL)?
洗滌液按1:20比例稀釋?
加樣孵育?:
每孔加入50μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本
洗滌?:
手工洗板需加滿洗滌液靜置1分鐘,重復(fù)5次?
顯色?:
加入TMB底物避光反應(yīng)15分鐘
五、關(guān)鍵注意事項(xiàng)
溫度控制?:
所有試劑使用前需室溫平衡20分鐘?
孵育時(shí)需密封防蒸發(fā)?
干擾因素?:
避免反復(fù)凍融樣本
質(zhì)量控制?:
建議標(biāo)準(zhǔn)品和樣本做復(fù)孔
六
以標(biāo)準(zhǔn)品OD值繪制曲線(建議使用四參數(shù)擬合)?
樣本濃度=測定值×稀釋倍數(shù)(若說明書注明需乘以系數(shù))?
七
靈敏度?:通常為0.04-6.4pg/mL?
回收率?:血清中平均為97-102%?
特異性?:不與類似膠原蛋白交叉反應(yīng)?
注:以上資料僅供參考
天津本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命
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