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人表皮生長因子受體(EGFR)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書
BS-1691人表皮生長因子受體(EGFR)ELISA試劑盒
以下是關(guān)于人表皮生長因子受體(EGFR)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說明
一、實(shí)驗(yàn)原理
采用雙抗體夾心法:將純化的EGFR捕獲抗體包被于微孔板形成固相抗體
二
預(yù)包被酶標(biāo)板?:96孔或48孔配置?
標(biāo)準(zhǔn)品?:凍干粉需用稀釋液復(fù)溶(典型濃度800pg/ml或4,000fmol/L)?
檢測抗體?:生物素標(biāo)記的抗EGFR抗體?
顯色系統(tǒng)?:TMB底物A/B、終止液?
洗滌緩沖液?:需按說明書稀釋?
三
樣本類型 處理方法
血清/血漿 2-8℃離心20分鐘(1000g)
組織勻漿 按1:9重量比加入PBS勻漿,5000g離心5-10分鐘?
細(xì)胞培養(yǎng)上清 直接離心(1000g
四
加樣?
空白孔加稀釋液,標(biāo)準(zhǔn)品孔梯度稀釋(建議雙孔檢測)
37℃孵育40分鐘?
洗滌?
使用1×洗滌液
加檢測抗體?
每孔加100μl生物素化抗體工作液
顯色與終止?
加入TMB底物避光反應(yīng)15-20分鐘,顯藍(lán)色后加終止液變黃色?
五
檢測范圍?:3.9-250pg/mL(EGF)或156-10,000pg/mL(EGFR)?
靈敏度?:≤1.6pg/mL?
重復(fù)性?:板內(nèi)/板間變異系數(shù)<10%?
六
所有液體組分使用前需充分混勻,避免泡沫?
不同濃度樣本需更換槍頭防止交叉污染?
顯色時(shí)間需根據(jù)實(shí)際調(diào)整
實(shí)驗(yàn)廢棄物應(yīng)按生物危害物處理?
注:以上資料僅供參考
天津本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命
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