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以下是關(guān)于?人觸珠蛋白相關(guān)蛋白(HPR)ELISA試劑盒?的實(shí)驗(yàn)使用說明,綜合整理自多份高可信度操作手冊及技術(shù)文檔?:
BS-1737 人觸珠蛋白相關(guān)蛋白(HPR)ELISA試劑盒
一
、檢測原理?采用?雙抗體夾心法?:
抗HPR單抗預(yù)包被于酶標(biāo)板
加入生物素化抗HPR抗體形成復(fù)合物
加入TMB顯色底物
,OD450nm吸光度值與HPR濃度呈正比,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線定量?。二
、試劑盒組成?組分 規(guī)格(96T) 保存條件
預(yù)包被酶標(biāo)板 8×12孔 4℃/-20℃干燥
凍干標(biāo)準(zhǔn)品 2支(2000pg/ml) -20℃
生物素化抗體 120μL 4℃(避光)
TMB顯色液 A/B液各6mL 4℃(避光)
終止液(2M) 6mL 室溫避光
20×濃縮洗滌液 50mL 室溫
注:不同品牌組分可能略有差異,需核對實(shí)際包裝?
。三
、樣本處理?血清/血漿?:
全血室溫靜置2小時(shí)或4℃過夜
避免溶血或高血脂樣本?
組織勻漿?:
用預(yù)冷PBS(pH7.4)沖洗組織
細(xì)胞培養(yǎng)上清?:
1000×g離心20分鐘去除碎片?
保存條件?:
短期(1周內(nèi))可4℃保存
四
試劑準(zhǔn)備?:
標(biāo)準(zhǔn)品:用400μL蒸餾水復(fù)溶,梯度稀釋(建議做復(fù)孔)?
洗滌液:20×濃縮液按1:20稀釋?
加樣與孵育?:
每孔加入50μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本,室溫孵育2小時(shí)?
顯色與終止?:
加入TMB底物避光顯色10-15分鐘
五
避免酶標(biāo)板底部接觸
不同批號試劑不可混用
終止液含強(qiáng)酸,操作時(shí)需佩戴防護(hù)用具?
注:以上資料僅供參考
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