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以下是?人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA試劑盒?的詳細(xì)實驗使用說明，綜合各品牌試劑盒通用操作流程及注意事項整理：
BS-1395人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA試劑盒
一
、試劑盒組成?預(yù)包被微孔板?：抗IDUA抗體包被的96孔或48孔板?
。標(biāo)準(zhǔn)品?：濃度梯度為0.156-10 ng/mL(具體以說明書為準(zhǔn))?
。檢測抗體?：HRP標(biāo)記的IDUA抗體?
。底物溶液?：TMB顯色液?。
終止液?：酸性溶液(如2M H?SO?)?
。洗滌緩沖液?：20-25倍濃縮液
，需稀釋使用?。二
、樣本處理?適用樣本?：血清
、血漿(EDTA/肝素抗凝)、細(xì)胞裂解液、組織勻漿等?預(yù)處理要求?：
血清/血漿：離心去除雜質(zhì)(1000×g，15-20分鐘)
組織樣本：勻漿后離心取上清?。
保存條件?：短期2-8℃
三
試劑平衡?：所有組分室溫平衡15-30分鐘(TMB需避光)?。
加樣?：
標(biāo)準(zhǔn)品/樣本每孔加50-100μL
空白孔加稀釋液對照?。
孵育?：37℃避光孵育1-5小時(具體時間參考說明書)?
。洗滌?：
棄液后每孔加洗滌液300μL
，靜置30秒后拍干，重復(fù)5次?。加檢測抗體?：每孔加HRP標(biāo)記抗體100μL，37℃孵育1小時?
。顯色?：
加TMB底物100μL
，避光反應(yīng)10-30分鐘(顯藍(lán)色)?。加終止液50μL
，顏色轉(zhuǎn)為黃色?。檢測?：450nm波長測OD值(參考630nm校正)?
。四
、數(shù)據(jù)分析?標(biāo)準(zhǔn)曲線?：以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)
，擬合四參數(shù)曲線?。濃度計算?：樣本OD值代入曲線方程，乘以稀釋倍數(shù)?
。五
、注意事項?質(zhì)量控制?：
每板需做標(biāo)準(zhǔn)曲線及復(fù)孔，CV%應(yīng)<10%?
樣本OD值超范圍時需稀釋后重測?。
操作細(xì)節(jié)?：
避免板孔干燥，孵育時覆蓋封板膜?
加樣需精準(zhǔn)
保存條件?：
未用板條密封保存于2-8℃或-20℃?
底物避光，終止液腐蝕性需防護?
六
檢測范圍?：0.156-10 ng/mL(靈敏度0.039 ng/mL)?
精密度?：板內(nèi)CV<8%
注：以上資料僅供參考
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