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大鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書
BS-3008 大鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒
以下是?大鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒?的實(shí)驗(yàn)使用說明書綜合整理：
一
、實(shí)驗(yàn)原理?采用?雙抗體夾心法?或?固相夾心法?ELISA技術(shù)
。通過包被抗體捕獲樣本中的TNF-β，再與酶標(biāo)抗體形成復(fù)合物，經(jīng)TMB顯色后，顏色深淺與TNF-β濃度成正比。二、試劑盒組成?
核心組分?：
預(yù)包被微孔板(96孔)
標(biāo)準(zhǔn)品(濃度梯度：15.6~1000 pg/mL
，凍干品需復(fù)溶)酶標(biāo)抗體(HRP標(biāo)記)
顯色底物(TMB A/B)
終止液(2N H?SO?)
濃縮洗滌液(20×~30×)
需自備器材?：
酶標(biāo)儀(450nm)
37℃恒溫箱、離心機(jī)(2000~5000×g)
三
血清/血漿?：全血室溫靜置2小時(shí)后離心(1000×g
組織勻漿?：按1:9(重量:體積)加入PBS勻漿
保存?：短期存于4℃
四
試劑準(zhǔn)備?：
復(fù)溫：所有試劑室溫平衡30分鐘。
稀釋洗滌液(如20×→1×)
。標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?：
按說明書梯度稀釋(如1000→500→250 pg/mL)
。加樣與溫育?：
加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本(100μL/孔)
，37℃孵育90分鐘。洗滌3次(每孔加洗滌液靜置1分鐘后甩干)。
顯色與檢測(cè)?：
加TMB底物(90μL/孔)
，避光反應(yīng)15分鐘→終止液(50μL/孔)。酶標(biāo)儀讀取OD450nm值。
五
、注意事項(xiàng)?關(guān)鍵控制點(diǎn)?：
移液精度誤差≤2%
，避免氣泡干擾。顯色液需避光現(xiàn)配
，終止液傾倒緩慢防濺。數(shù)據(jù)計(jì)算?：
以標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合樣本濃度(推薦四參數(shù)邏輯曲線)。
保存條件?：
未開封試劑盒：2-8℃保存6個(gè)月;開封后板條需密封防潮
。六
、常見問題?顯色異常?：檢查底物是否過期或污染。
高背景值?：洗滌不凈或樣本濃度過高(需稀釋)
。注：以上資料僅供參考
，如需具體品牌試劑盒的完整說明，可咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商的詳細(xì)文檔。本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命
，追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀(jì)守法技術(shù)支持：化工儀器網(wǎng) 管理登陸 網(wǎng)站地圖
