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人腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒的實驗使用說明書核心內(nèi)容如下:
BS-0120人腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒
一
、實驗原理?采用?雙抗體夾心法?檢測TNF-β濃度:
包被抗體?:微孔板預包被抗人TNF-β單克隆抗體
。抗原結合?:樣本或標準品中的TNF-β與固相抗體結合,形成復合物
酶標抗體反應?:加入HRP標記的二抗
顯色與定量?:TMB底物顯色(藍色→黃色),450nm測OD值
二、試劑盒組成?
預包被微孔板
標準品(如180
HRP標記檢測抗體
樣本稀釋液
、洗滌液、顯色液(TMB)、終止液三
、樣本處理要求?樣本類型 處理方法 保存條件
血清? 3000g離心10min
,取上清 -20℃避免凍融血漿? EDTA/肝素抗凝,3000g離心30min -20℃保存
細胞上清? 3000g離心10min去除顆粒 -20℃分裝保存
注意?:避免溶血
、脂血或NaN3干擾。四、操作步驟?
標準品稀釋?:2倍梯度稀釋(如180→15 ng/L)
,每孔50μL。加樣?:樣本稀釋5倍后加樣(40μL稀釋液+10μL樣本)。
溫育?:37℃孵育30分鐘
。洗滌?:洗滌3-5次
,去除未結合物質。顯色與終止?:TMB避光顯色15分鐘
,加終止液變黃。五、結果計算?
以標準品濃度為橫坐標
,OD值為縱坐標繪制標準曲線。樣本濃度通過曲線方程計算,靈敏度通?div id="4qifd00" class="flower right">
六、注意事項?
試劑保存?:2-8℃避光
,有效期6個月。避免污染?:移液器槍頭需更換,避免交叉污染
。顯色控制?:顯色時間過長可能導致假陽性
。注:以上資料僅供參考,如需進一步了解ELISA操作步驟或樣本處理方法
,可參考試劑盒說明書。本生一直視質量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升
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