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人角化細胞生長因子(KGF)ELISA試劑盒實驗使用說明書
以下是關于人角化細胞生長因子(KGF)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合整理:
BS-0186 人角化細胞生長因子(KGF)ELISA試劑盒
一
采用雙抗體夾心法(或雙抗原夾心法)檢測樣本中KGF濃度
二、試劑盒組成
主要組分?
預包被微孔板(96孔或48孔)
標準品(凍干粉
,通常含2-8管,濃度0-400 pg/mL不等)酶標抗體、生物素化抗體
、HRP標記親和素(不同品牌配置差異)TMB底物液
、終止液(2N H?SO?)濃縮洗滌液(需20-30倍稀釋)
自備物品?
酶標儀(450nm)
、移液器及槍頭37℃恒溫箱、蒸餾水
三
、樣本處理樣本類型 處理方法
血清? 室溫凝固10-20分鐘后
,2000-3000rpm離心20分鐘,避免溶血血漿? EDTA/肝素抗凝
細胞上清? 1000-3000rpm離心10-20分鐘去除顆粒
組織勻漿? PBS勻漿后離心取上清
注意?:避免反復凍融;NaN?會抑制HRP活性,需排除此類樣本
四
試劑準備?
標準品復溶:加入指定體積稀釋液(如0.5-1mL),靜置10分鐘混勻
洗滌液稀釋:按1:19~1:20比例用蒸餾水配制。
檢測流程?
加樣:標準品/樣本每孔50-100μL
孵育:37℃溫育60-120分鐘
洗板:手工或洗板機洗滌4-6次,拍干
加酶標抗體:每孔100μL
顯色:加入TMB底物
終止:加入終止液后15分鐘內測定450nm OD值。
五
保存條件?:未開封試劑盒2-8℃保存;溶解后標準品建議分裝凍存
精密度?:批內CV<10%,批間CV<12%
干擾因素?:溶血
注:以上資料僅供參考
天津本生一直視質量控制為企業(yè)的生命