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人CD14分子(CD14)ELISA試劑盒實驗使用說明書
BS-9960 人CD14分子(CD14)ELISA試劑盒
試劑盒組成
預(yù)包被微孔板:96孔板
標(biāo)準(zhǔn)品:凍干重組CD14蛋白(濃度梯度:9.375-600ng/mL,需用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液復(fù)溶)
檢測抗體:生物素標(biāo)記抗CD14多克隆抗體(100×濃縮液,需稀釋后使用)
酶結(jié)合物:HRP標(biāo)記鏈霉親和素(100×濃縮液)
配套試劑:
TMB顯色液(A/B液分裝)
終止液(2M LS)
洗滌緩沖液(30×濃縮,需稀釋)
樣本稀釋液(含1% BSA的PBS緩沖液)
樣本處理要求
血清/血漿:EDTA抗凝,3000rpm離心10分鐘
細(xì)胞上清:離心去除顆粒物,直接檢測或-20℃分裝保存(避免反復(fù)凍融)
組織勻漿:按1:9加入PBS(pH7.4)勻漿,離心取上清
實驗步驟
標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋:用樣本稀釋液配制6個濃度梯度(最高濃度600ng/mL
加樣孵育:
每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品/樣本
棄液后每孔加350μL洗滌緩沖液,重復(fù)洗滌5次
顯色檢測:
加入100μL生物素化抗體工作液
洗滌后加入100μL酶結(jié)合物工作液
加入TMB顯色15分鐘,終止液終止反應(yīng)
數(shù)據(jù)分析
標(biāo)準(zhǔn)曲線:以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)
靈敏度:檢測限3.3ng/mL
注意事項
試劑盒保存:未開封時標(biāo)準(zhǔn)品-20℃保存
避免使用含NaN3的樣本,HRP活性會被yizhi
實驗建議:同一批次完成檢測
注:以上資料僅供參考
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