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人白細(xì)胞分化抗原30(CD30)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書(shū)
BS-0017人白細(xì)胞分化抗原30(CD30)ELISA試劑盒
以下是人白細(xì)胞分化抗原30(CD30) ELISA試劑盒的規(guī)范使用說(shuō)明
,本生整合了多個(gè)品牌試劑盒的通用操作流程與注意事項(xiàng):一
、試劑盒組成?核心組分?
預(yù)包被抗CD30抗體的96孔酶標(biāo)板(可拆分為48T/96T規(guī)格)?
凍干CD30標(biāo)準(zhǔn)品(濃度范圍:2.5–40 ng/L
生物素標(biāo)記的抗CD30抗體(即用型)?
HRP標(biāo)記的親和素(即用型)?
TMB底物液(A液與B液需混合使用)及終止液(2N H?SO?)?
輔助試劑?
洗滌緩沖液(20×濃縮液,需按1:20稀釋)?
樣本稀釋液(用于血清/血漿預(yù)處理)?
二
采集與保存?
血清/血漿?:全血靜置10-20分鐘后離心(2000–3000 rpm,20分鐘)
細(xì)胞上清/組織勻漿?:離心去除顆粒物后檢測(cè)
注意事項(xiàng)?
避免使用含NaN?的保存液,以免HRP活性?
細(xì)菌污染的樣本可能導(dǎo)致假陽(yáng)性
三
標(biāo)準(zhǔn)品制備?
凍干標(biāo)準(zhǔn)品按說(shuō)明書(shū)復(fù)溶(如0.5mL樣本稀釋液溶解)
加樣與孵育?
每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品/樣本
,37℃孵育90分鐘?。洗滌3次后
,加入100μL生物素標(biāo)記抗體,37℃孵育60分鐘?。再次洗滌
,加入100μL HRP-親和素,37℃孵育30分鐘?。顯色與終止?
每孔加入100μL TMB底物,避光顯色15–20分鐘(顏色由藍(lán)轉(zhuǎn)黃)?
。加入50μL終止液
,顏色轉(zhuǎn)為黃色,10分鐘內(nèi)測(cè)定OD450nm值?。四
、結(jié)果計(jì)算?以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)、OD值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線
,樣本濃度通過(guò)曲線方程計(jì)算?。檢測(cè)靈敏度通常≤1.0 ng/L
,批內(nèi)CV≤15%?。五、常見(jiàn)問(wèn)題處理?
問(wèn)題? ?可能原因? ?解決方案?
顯色過(guò)弱 孵育時(shí)間不足/抗體失活 延長(zhǎng)孵育時(shí)間或更換新鮮試劑?
背景偏高 洗滌不充分/底物污染 增加洗滌次數(shù)或更換底物?
標(biāo)準(zhǔn)曲線異常 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋錯(cuò)誤 嚴(yán)格按梯度稀釋并短暫離心混勻?
六
、注意事項(xiàng)?試劑盒僅限科研使用
,不可用于臨床診斷?。操作時(shí)避免使用金屬器材接觸酶標(biāo)板
,防止靜電干擾?。未用完的酶標(biāo)板需密封保存于2–8℃,避免受潮?
。注:以上資料僅供參考
,具體請(qǐng)咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。人白細(xì)胞分化抗原30(CD30)ELISA試劑盒 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命
,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng) 管理登陸 網(wǎng)站地圖