，PCR耗材，離心管，進(jìn)口吸頭等等。

　　應(yīng)用范圍：血清

、血漿、組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它相關(guān)液體(本產(chǎn)品僅供實(shí)驗(yàn)室科研及非臨床用途)

　　一

、服務(wù)

　　我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要，比如在檢測(cè)范圍

、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求，而量身定制檢測(cè)試劑盒，有效控制檢測(cè)試劑成本。并可提供免費(fèi)代測(cè)。

　　如果您在使用elisa試劑盒產(chǎn)品時(shí)有任何的疑問

，或者對(duì)我們有任何意見建議，您都可以通過來電或QQ咨詢，我們的銷售/技術(shù)工程師7×24h為您服務(wù)。

　　二、ELISA檢測(cè)概述

　　ELISA(酶聯(lián)接免疫吸附反應(yīng)分析)是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)

，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。 由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。

　　實(shí)際應(yīng)用中，通過不同的設(shè)計(jì)

，具體的方法步驟可有多種。即：用于檢測(cè)抗體的間接法、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。目前我們對(duì)客戶提供比較常用的ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法服務(wù)。

三、技術(shù)流程

雙抗體夾心法(檢測(cè)未知抗原)

間接法(檢測(cè)未知抗體)

1 、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml 。在反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過夜 。次日 ，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次 。 　　2 、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí) 。然后洗滌(同時(shí)做空白孔 ，陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。 　　3 、加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中 ，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí) ，洗滌 。 　　4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml ，37℃ 10～30分鐘 。 　　5 、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml 　　6、結(jié)果判定：可于白色背景上 ，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深 ，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺 ，依據(jù)所呈顏色的深淺 ，以“+”、“-”號(hào)表示 。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上 ，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處 ，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值 ，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽

1 、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml ， 每孔加0.1ml，4℃過夜 。次日洗滌3次 。 　　2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌 。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照) 　　3 、加酶標(biāo)抗體：于反應(yīng)孔中 ，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml，37℃孵育30-60分鐘 ，洗滌,后一遍用DDW洗滌 。 　　4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml ，37℃ 10～30分鐘 。 　　5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml 　　6 、結(jié)果判定：可于白色背景上 ，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng) ，陰性反應(yīng)為無色或極淺 ，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+” 、“-”號(hào)表示 。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上 ，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處 ，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值 ，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽性 。

 　　四

、客戶須知

　　1、液體類標(biāo)本(細(xì)胞培養(yǎng)上清

、組織勻漿、血清、血漿、尿液、胸水、腹水、腦脊液等);

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