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人P選擇素（P-Selectin/CD62P）ELISA試劑盒

產(chǎn)品型號：BS-0097
產(chǎn)品時間：2024-09-20
簡要描述：人P選擇素（P-Selectin/CD62P）ELISA試劑盒本生生物公司供應：ELISA試劑盒，動物血清，熒光定量PCR耗材
，移液器吸嘴
，微量離心管，進口凍存管
，細胞培養(yǎng)皿，培養(yǎng)板，培養(yǎng)瓶
，吸頭，儀器及手套，色譜耗材
，針頭過濾器
。

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產(chǎn)品簡介

人P選擇素(P-Selectin/CD62P)ELISA試劑盒本生生物公司供應：ELISA試劑盒,動物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進口凍存管,細胞培養(yǎng)皿,培養(yǎng)板,培養(yǎng)瓶,進口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器,分光光度計。

本試劑盒僅供研究使用

檢測范圍： 96T

使用目的：

本試劑盒用于測定人血清

、血漿及相關(guān)液體樣本中P選擇素(P-Selectin/CD62P)含量

。

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中P選擇素(P-Selectin/CD62P)水平。用純化的P選擇素(P-Selectin/CD62P)抗體包被微孔板

，制成固相抗體

，往包被單抗的微孔中依次加入P選擇素(P-Selectin/CD62P)，再與HRP 標記的P選擇素(P-Selectin/CD62P)抗體結(jié)合

，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物

，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色

，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色

。顏色的深淺和樣品中的P選擇素(P-Selectin/CD62P)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值)

，通過標準曲線計算樣品中P選擇素(P-Selectin/CD62P)濃度

。

試劑盒組成：

1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 ; 2 酶標試劑 6ml×1 瓶

3 酶標包被板 12 孔×8 條 ; 4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶

5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 ; 6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶

7 終止液 6ml×1 瓶; 8 標準品(48ng/ml) 0.5ml×1 瓶

9 標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶; 10 說明書 1 份

11 封板膜 2 張; 12 密封袋 1 個

標本要求

1. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行

，提取后應盡快進行實驗

。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存

，但應避免反復凍融

2. 不能檢測含 NaN3 的樣品

，因 NaN3 抑制胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)活性。

操作步驟

1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支

，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋

。

60 ng/L5 號標準品150µl 的原倍標準品加入 150µl 標準品稀釋液

30 ng/L4 號標準品150µl 的 5 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液

15 ng/L3 號標準品150µl 的 4 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液

7.5 ng/L2 號標準品150µl 的 3 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液

3.75 ng/L1 號標準品150µl 的 2 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液

2. 加樣：分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同)

、標準孔

、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl

，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl

，

然后再加待測樣品 10µl(樣品終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部

，盡

量不觸及孔壁

，輕輕晃動混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘

。

4. 配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜

，棄去液體

，甩干，每孔加滿洗滌液

，靜置 30 秒后棄去

，如此重復 5 次，拍干

。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑 50µl

，空白孔除外。

7. 溫育：操作同 3

。

8. 洗滌：操作同 5

。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl

，輕輕震蕩混勻

，37℃避光顯色

15 分鐘.

10. 終止：每孔加終止液 50µl，終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)

。

11. 測定：以空白空調(diào)零

，450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。測定應在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進行

。

人P選擇素(P-Selectin/CD62P)ELISA試劑盒

操作程序總結(jié)：

計算:

以標準物的濃度為橫坐標

，OD 值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線

，根據(jù)樣品的OD 值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與 OD 值計算出標準曲線的直線回歸方程式

，將樣品的 OD 值代入方程式，計算出樣品濃度

，再乘以稀釋倍數(shù)

，

即為樣品的實際濃度。

注意事項

1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用

，酶標包被板開封后如未用完

，板條應裝入密封袋中保存。

2. 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出

，稀釋時可在水浴中加溫助溶

，洗滌時不影響結(jié)果。

3. 各步加樣均應使用加樣器

，并經(jīng)常校對其準確性

，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5 分鐘內(nèi)

，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣

。

4. 請每次測定的同時做標準曲線

，做復孔

。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本 OD 值大于標準品孔孔的 OD 值)，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定

，計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)

。

5. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染

。6.底物請避光保存

。

7. 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8. 所有樣品

，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理

。

9. 本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異

，以英文說明書為準

。

保存條件及有效期

1. 試劑盒保存：;2-8℃。

2. 有效期：6 個月

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